Cloning TV anh tìm đc là "Dòng hóa".
Từ Clone theo nghĩa tiếng Anh nghĩa là "nhân bản", vd như trong facebook, game nói ng` này clone nhiều acc là tạo ra nhìu nhân vật/account.
Trong Sinh học cloning nghĩa là nhân bản 1 cá thể, 1 đoạn DNA... lên thành nhìu bản giống y hệt.
____
Ligation-independent cloning (LIC) là 1 phương pháp clone DNA, dựa trên cơ bản của phương pháp clone chúng ta thường học (dùng restriction enzyme cắt DNA => dán vào vector...). Một nhược điểm của phương pháp "cổ điển" này là đầu dính tạo ra bởi Restriction enzyme quá nhỏ (độ dài tầm 3-5 nucleotide) nên khi dán vào vector nó kg chắc, hoặc sẽ kg dính....
Dựa trên đó, phương pháp ligation-independent cải tiến bước bắt cặp vào vector. Về cơ bản, cặp DNA cần clone sẽ đc nhân lên = PCR. Sau đó cả đoạn DNA này và vector sẽ đc tạo một đầu dính có độ dài tới 16-18 nucleotide. Dĩ nhiên, khi dán vào chúng sẽ tự động bắt cặp với nhau mạnh hơn do có nhiều liên kết hơn.
Gọi là ligation-independent vì nó hoạt động kg cần DNA ligase - enzyme dùng để nối đoạn DNA và vector dùng trong phương pháp "cổ điển". Bước này gọi là ligation.
_____
Nói thêm 1 chút về Ligation-dependent có lẽ em nên biết. Nó hoạt động nhờ vào 1 đặc tính rất quan trọng của T4 Polymerase. Nó vừa có đặc tính tổng hợp DNA (5'=>3') vừa có đặc tính cắt bỏ DNA (3'=>5') - cắt tới đâu, tổng hợp tới đó cả ngày. Trong phương pháp này, T4 polymerase đc dùng để tạo ra vết dính dài như trên. Đơn giản chỉ cần cắt vector cho lòi ra đầu 3', sau đó dùng T4P để cắt các đoạn 3'=>5' từ từ tạo ra 1 vết dính dài, ng ta kg thêm vào các nucleotide tự do để "cấm vận" đặc tính tổng hợp DNA của polymerase. Tương tự cho đoạn DNA mình cần.