Ho Huu Tho
Senior Member
Các thư viện của ADN bộ gen còn vô cùng giá trị trong việc tách các gen có mức biểu hiện thấp (nghĩa là tạo ra ít mARN) và xác định vị trí trên nhiễm sắc thể của các gen gây bệnh. Các phân tử trung gian dùng trong các thư viện bộ gen được thiết kế để có khả năng ghép với ADN dòng hóa có kích thước lớn hơn so với khả năng này của các plasmid. Phân tử trung gian đầu tiên trong số này là virus lambda , một vi rút gây nhiễm vi khuẩn, đó là phân tử trung gian có thể mang đoạn chèn vào có kích thước tới 15 kb. Tiếp theo là cosmid, một phức hợp lai giữa một plasmid và một thực khuẩn thể (vi rút gây nhiễm vi khuẩn) với đoạn chèn ADN có kích thước tới 45 kb. Sự phát triển nhiễm sắc thể nhân tạo dạng thẳng của nấm men (YAC), là nhiễm sắc thể bao gồm tâm động, vùng khởi đầu sao chép, và các đầu tận (telomer), là nhiễm sắc thể có thể nhân lên trong nấm men Saccharomyces cerevisiae, mang được các dòng có kích thước 200 kb cho tới trên 2000 kb. Sự phát triển sau đó của nhiễm sắc thể nhân tạo vi khuẩn (BAC) chứa đoạn ADN chèn vào có kích thước 100 kb và việc nuôi cấy chúng khá dễ dàng đã làm cho việc tạo dòng bộ gen nằm trong tầm tay của bất cứ phòng thí nghiệm sinh học phân tử nào. (Các dòng càng lớn thì càng khó hơn khi làm việc với chúng.)#24.15
Genomic DNA libraries have also proved invaluable for isolating genes that are poorly expressed (that is, make little mRNA) and for mapping disease-causing genes to specific chromosomal sites. The vectors used in genomic libraries are designed to incorporate greater lengths of cloned DNA than plasmids can carry. The first of these vectors was the lambda bacterial virus, which could hold an insert of 15 kb, followed by the cosmid, a hybrid between a plasmid and a phage (a virus that infects bacteria) with a DNA insert size of 45 kb. Development of linear yeast artificial chromosomes (YACs), which include a yeast centromere, origin of replication, and ends (telomeres), which successfully grow in the yeast Saccharomyces cerevisiae, carry clones of 200 kb to more than 2,000 kb. Subsequent development of bacterial artificial chromosomes (BACs) that contain 100 kb of insert DNA and are relatively easy to culture has put genomic cloning within reach of almost every molecular biology laboratory. (Clones are harder to work with as they get larger.)