Vài câu hỏi vế thí nghiệm biến nạp.

[donphins_kg]

1) Bằng cách nào tách được các tế bào biến nạp thành công ra khỏi tế bào không được biến nạp?
2) Có thể tăng hiệu suất biến nạp bằng cách nào ? tại sao?
3) Nêu vai trò của gen kháng kháng sinh và gen Lac Z trong việc nhận biết các thể biến nạp.

 

[Nguyễn Thy Ngọc]

Vector nhân dòng của bạn khi đặt mua đã có gen chọn lọc kháng kháng sinh rồi cơ mà, xem từ hãng sản xuất xem kháng kháng sinh loại nào thì bổ sung kháng sinh loại đó vào môi trường, tế bào không nhận được vector (ko được biến nạp đương nhiên sẽ chết)

Có thể tăng hiệu suất của biến nạp bằng cách sau khi biến nạp vector vào tế bào khả biến thì ly tâm nhẹ dịch (nhớ là nhẹ thôi nhé, thành TB khả biến rất mỏng manh, ly tâm mạnh nó sẽ phá vỡ TB đó - có thể ly tâm ở khoảng 1000rpm-60s) rùi bỏ dịch ở trên đi, dịch ở dưới đem chan lên đĩa thạch.

 

[Nchicken]

Vector nhân dòng của bạn khi đặt mua đã có gen chọn lọc kháng kháng sinh rồi cơ mà, xem từ hãng sản xuất xem kháng kháng sinh loại nào thì bổ sung kháng sinh loại đó vào môi trường, tế bào không nhận được vector (ko được biến nạp đương nhiên sẽ chết)

Có thể tăng hiệu suất của biến nạp bằng cách sau khi biến nạp vector vào tế bào khả biến thì ly tâm nhẹ dịch (nhớ là nhẹ thôi nhé, thành TB khả biến rất mỏng manh, ly tâm mạnh nó sẽ phá vỡ TB đó - có thể ly tâm ở khoảng 1000rpm-60s) rùi bỏ dịch ở trên đi, dịch ở dưới đem chan lên đĩa thạch.

Nếu vector của mình không có gene kháng kháng sinh thì sao?
Mục đích ly tâm của bạn là làm j? Sau khi biến nạp xong là chang lên mặt thạch luôn à bạn? Bạn sử dụng phương pháp biến nạp nào vậy?

 

[Nguyễn Thy Ngọc]

Thường các vector thương mại đều có gen kháng kháng sinh để dễ chọn lọc. Còn vector của bạn thì có thể up ảnh lên cho mọi người cùng xem.
Sau khi biến nạp và nuôi lắc thì ly tâm nhẹ. Mục đích là tăng mật độ tế bào trong canh trường thui. (Cái này theo kinh nghiệm tiền bối truyền lại - up lên cho mọi người cùng tham khảo).

 

[Nchicken]

Thường các vector thương mại đều có gen kháng kháng sinh để dễ chọn lọc. Còn vector của bạn thì có thể up ảnh lên cho mọi người cùng xem.
Sau khi biến nạp và nuôi lắc thì ly tâm nhẹ. Mục đích là tăng mật độ tế bào trong canh trường thui. (Cái này theo kinh nghiệm tiền bối truyền lại - up lên cho mọi người cùng tham khảo).

Theo mình biết thì bên cạnh chọn lọc bằng gên kháng kháng sinh còn có thể sử dụng chỉ thị chọn lọc Gene X-gal hay là Zeocin

 

[Nguyễn Xuân Hưng]

Theo mình biết thì bên cạnh chọn lọc bằng gên kháng kháng sinh còn có thể sử dụng chỉ thị chọn lọc Gene X-gal hay là Zeocin

Theo mình hiểu câu trên thì Zeocin không phải là kháng sinh à?