Thạch Thành Trung
Senior Member
Em đang quan tâm đến hệ thống vector Topo pCR2.1 nhưng những thông tin về nó còn khá hạn chế. Không biết tiền bối nào có tài liệu hay đã thao tác qua nó rồi thì chỉ bảo giúp em với.
Follow along with the video below to see how to install our site as a web app on your home screen.
Note: This feature may not be available in some browsers.
Em đang quan tâm đến hệ thống vector Topo pCR2.1 nhưng những thông tin về nó còn khá hạn chế. Không biết tiền bối nào có tài liệu hay đã thao tác qua nó rồi thì chỉ bảo giúp em với.
Đây là một trong những hướng nghiên cứu của lab, và em phải viết một đề cương chi tiết để báo cáo lại với giáo viên hướng dẫn để xem khả năng thực hiện được đến đâu. Hiện tại giáo viên hướng dẫn không ở gần vả lại đây không phải là một đề tài tốt nghiệp nên tất cả từ A-Z em phải làm, giáo viên hướng dẫn chỉ cố vấn những điểm nào vướng mắc mà thôi.
Tài liệu thì em tự search và dựa vào một số đề tài của anh chị. Rất tiếc là post hoài mà không được, để hôm sau upload cho pakon tham khảo vậy
To tát gì đâu anh ơi, em chỉ phụ trách một mảng của đề tài này thui.
Thanks anh Cường về tài liệu trên, em đã đọc qua trước đây rồi, hi vọng được anh và mọi người cung cấp thêm một số tài liệu khác
Đây là một trong những tài liệu giới thiệu về tính ưu việt của Topo vector so với những vector tạo dòng thông thường khác:
www.invitrogen.com/content/sfs/brochures/710-021164-CustomTOPOBrochure.pdf
em cũng đang làm về tạo dòng. Việc ligase giữa sp PCR và vector tốt nhất là khi nào.?
khi sp PCR vừa mới chạy ra hay sp PCR đã để lâu.
việc sử dụng sp PCR đã cũ có anh hưởng lớn gì đến kết quả của clone không?
có nên sử dụng sp PCR cũ không. (trong tình huống của em là không có thể tạo ra sản phẩm pcr mới được.)
em cũng đang làm về tạo dòng. Việc ligase giữa sp PCR và vector tốt nhất là khi nào.?
khi sp PCR vừa mới chạy ra hay sp PCR đã để lâu.
việc sử dụng sp PCR đã cũ có anh hưởng lớn gì đến kết quả của clone không?
có nên sử dụng sp PCR cũ không. (trong tình huống của em là không có thể tạo ra sản phẩm pcr mới được.)
trong tình huống của em là không có thể tạo ra sản phẩm pcr mới được
Trong trường hợp của em : sản phẩm pcr của em sẽ được tinh sạch theo kit của Qiagen sau đó em dùng vector pGEM- T easy để gắn kết vào. Hình như vecto này kết theo kiểu T-A. Dòng ecoli sử dụng là DH5- alpha
Các sản phẩm PCR được trữ ở -20 oC, sản phẩm tạo được tạo ra cách đây khoảng 1-2 tháng.
Heo của bạn có gì đặc biệt không? Ra chợ mua lách về chắc cũng xài đượcEm không thề Pcr các sản phẩm mới vì hết mẫu (lách heo)
Kit cua Promega thì thường là chạy tốt đó.Kit ly trích RNA promega không ổn định(lúc ly trích được, lúc không). khi ly trích thường bị kẹt ngay cột không ly tâm xuống được dù đã rất cẩn thận trong việc hút, không biết tại sao chúng kẹt hoài, phải đổ ra, sau đó chạy PCR thì không có sp.
Kit ly trích RNA promega không ổn định(lúc ly trích được, lúc không). khi ly trích thường bị kẹt ngay cột không ly tâm xuống được dù đã rất cẩn thận trong việc hút, không biết tại sao chúng kẹt hoài, phải đổ ra, sau đó chạy PCR thì không có sp. anh chị nào có protocol, kinh nghiệm ly trích theo kiểu này giúp em với. email em là apollo0272000@gmail.com
Trong trường hợp của em : sản phẩm pcr của em sẽ được tinh sạch theo kit của Qiagen sau đó em dùng vector pGEM- T easy để gắn kết vào. Hình như vecto này kết theo kiểu T-A. Dòng ecoli sử dụng là DH5- alpha
Các sản phẩm PCR được trữ ở -20 oC, sản phẩm tạo được tạo ra cách đây khoảng 1-2 tháng.
Em không thề Pcr các sản phẩm mới vì hết mẫu (lách heo)
Kit ly trích RNA promega không ổn định(lúc ly trích được, lúc không). khi ly trích thường bị kẹt ngay cột không ly tâm xuống được dù đã rất cẩn thận trong việc hút, không biết tại sao chúng kẹt hoài, phải đổ ra, sau đó chạy PCR thì không có sp. anh chị nào có protocol, kinh nghiệm ly trích theo kiểu này giúp em với. email em là apollo0272000@gmail.com