Phương pháp làm tăng nồng độ DNA

[Nguyễn Kim Ngân]

Em chào mọi người, em xin được hỏi về phương pháp làm tăng nồng độ DNA thu được sau khi tách chiết, rất mong được mọi người tư vấn ạ.
Chuyện là em đang thực tập tách DNA từ mẫu máu đông, sử dụng bộ kit của QIAGEN; dung dịch em thu được sau khi tách có nồng độ DNA vào khoảng 17-40 ng/ul, nếu như em cần tăng nồng độ đó lên 100 ng/ul thì có khả thi không ạ? Vì thể tích dung dịch tách chiết được còn khá ít (khoảng 100 ul) nên em ko dám cô cạn nữa.
Em xin cảm ơn mọi người nhiều.

 

[Asakura Huy]

Chào bạn,
Khi sử dụng kit tách chiết, muốn tăng nồng độ DNA, bạn cần giảm thể tích dung dịch Elution buffer xuống, muốn tăng lên 100ng/ul thì bạn giảm xuống khoảng 50ul thử. Còn nếu bạn muốn tăng nồng độ mẫu DNA đã tách chiết rồi thì chỉ còn 1 cách là lập lại quy trình từ bước cho DNA bám cột trở về sau hoặc dùng kit tinh sạch DNA rồi giảm nồng độ Elution buffer. Tuy nhiên, theo mình lập lại quy trình thì cũng mất một lượng DNA nhất định.

 

[chandat]

Hic khó hiểu thế nhỉ

 

[Asakura Huy]

Hi bạn, trước hết bạn xác định thành phần của 1 bộ kit tách chiết trước. Nồng độ DNA cao hay thấp phụ thuộc vào hiệu quả ly giải mẫu và thể tích cuối cùng bạn dùng thu mẫu. Với kit Qiagen thì hiệu quả ly giải mẫu khá tốt nên muốn tăng nồng độ mẫu chỉ còn 1 cách tốt là giảm thể tích dung dịch bạn thu mẫu (Elution buffer). Nếu bạn chưa hiểu về kit tách chiết hay PCR thì có thể gửi email cho mình: asakura.huy@gmail.com.

 

[lovekieu]

Sử dụng bộ kít này nhé:
https://www.zymoresearch.com/dna/dn...ean-up-concentration/dna-clean-concentrator-5

Bạn đang có 100ul với nồng độ 17-40 ng/ul thì bạn cô về 10ul sẽ có nồng độ 170-400ng/ul. Hoặc cô về 20ul thì có nồng độ khoảng 85 đến 200ng/ul.

Bộ kit này chỉ rẻ bằng 70% bộ kit của Qiagen thôi.

 

[Nguyễn Kim Ngân]

Em cảm ơn các bác ạ

 

[Nguyễn Kim Ngân]

Em cảm ơn mọi người ạ Hic mãi mới vào lại được post.

 

[lymxymer]

Bài viết hay và rất đáng đọc!