Mình có 3 Restriction Endonuclease. Cả 3 enzyme giới hạn đó đều có các đặc tính giống nhau như (lysis buffer, nhiệt độ tối ưu cho cắt ADN). Khác nhau là về thời gian ủ (2 enzyme đòi hỏi 16 tiếng, 1 đòi hỏi 4 tiếng khi đã làm chuẩn giữa đơn vị (unit) của enzyme/ lượng ADN cần cắt theo hướng dẫn của nhà sản xuất)
Xin hỏi các bạn có nhiều kinh nghiệm về enzyme giới hạn như sau:
1. Mình có thể dùng tổ hợp cả 3 loại enzyme trên trong cùng một phản ứng cắt??? kết quả có thể bị ảnh hưởng hay không (sự tương tác giữa các enzyme)???
2. Sau khi cắt xong. Bạn dùng phương pháp nào để xác định hiệu quả cắt của enzyme (vì hiệu quả mình mong muốn cắt được càng cao càng tốt, 100%) loại trừ phương pháp điện di trên ?agarose gel. (vì rất khó có thể xác định được chính xác hiệu quả cắt của enzyme)
Cám ơn nhiều và chúc sức khỏe!
Xin hỏi các bạn có nhiều kinh nghiệm về enzyme giới hạn như sau:
1. Mình có thể dùng tổ hợp cả 3 loại enzyme trên trong cùng một phản ứng cắt??? kết quả có thể bị ảnh hưởng hay không (sự tương tác giữa các enzyme)???
2. Sau khi cắt xong. Bạn dùng phương pháp nào để xác định hiệu quả cắt của enzyme (vì hiệu quả mình mong muốn cắt được càng cao càng tốt, 100%) loại trừ phương pháp điện di trên ?agarose gel. (vì rất khó có thể xác định được chính xác hiệu quả cắt của enzyme)
Cám ơn nhiều và chúc sức khỏe!