Search results

Các bác tiền bối nào mở lab, lập lab thì cho em gửi đơn xin việc với. Em ở Hà nội ạ.

Mình tách chiết RNA từ mammalian cell bằng Trizol rồi điện di trên gel. Bình thường thì vẫn nhìn thấy 2 band tương ứng với 28s và 18s rRNA. Nhưng 2 lần làm gần đây thay vì thấy 2 band mà là 3 band (band lạ nằm giữa 2 band rRNA). Mình không thể nào giải thích nổi band lạ có nguồn gốc từ đâu nữa...

Bạn nào có thể down giúp mình vài bài báo này không: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21136155 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21339490 Mình cảm ơn trước nhé! :thanks: Mail của mình là: seashell2604@gmail.com

Trời, sao biết đại ca tự pha dye? Công thức đây: Make 10X loading dye 20% glycerol 0.1 M disodium EDTA, pH=8 (adjusted by Tris base) 1% SDS 0.25% bromphenol blue Từ "anh" là không đúng đâu nhé! ặc ặc

Thank bạn đã quan tâm. Mình không đang ở Việt Nam. Công việc của mình cũng nhiều thứ lắm. Hiện giờ mình đang làm nhiều về Sinh học phân tử: PCR, cloning...không biết công việc của bạn là gì, chúc bạn thành công nha!

Thank bạn đã quan tâm. Mình không đang ở Việt Nam. Công việc của mình thì cũng nhiều thứ lắm. Mình đang làm nhiều về mảng Sinh học phân tử: PCR, cloning...

Xin hỏi không rõ bác nói về cái N5 ((DNA suspension buffer) là cái gì ạ?

Nè ban! Sau khi cho S3 (của mình không phải N3) thì không được phép ủ dung dịch lysate trên đá. Mà ly tâm lạnh cũng không đúng vì theo mình biết thì protein không kết tủa được ở nhiệt độ thấp. Mình dùng Midi kit Qiagen code 12943

Có lẽ là bước ly tâm của em. Máy li tâm không hiểu sao chỉ chỉnh được đến tối đa 4000 rpm. Sau khi bỏ Sol III vào em chỉ ly tâm 4000rpm, trong 5 phút. Như vậy có ảnh hưởng không ạ. Cách của anh Lương cũng hay, em có thể thử ạ.

Chào các bác! Em đang cần tách plasmid. Em dùng Midi kit của Qiagen. Vấn đề là có lúc em tách thu được nồng độ plasmid cao, có lúc thì thu được nồng độ rất thấp (tất cả plasmid đều là high copy) mặc dù đã tăng thể tích dịch nuôi vi khuẩn lên 4 lần (100 ml). Em băn khoăn không biết mình đã sai...

Có người mách cho em một cách như sau: Tăng gấp đôi nồng độ muối trong washing solution để tăng điện tích dương cho cột silica, nên em elute thành công rồi. :smile: ___________________________________ HÃY ĐAM MÊ VÀ BIẾN NIỀM ĐAM MÊ ẤY THÀNH SỰ THẬT ! Hãy lắng nghe tiếng nói của lòng đam mê...

Em chào các bác! Em đang thôi gel cho phân đoạn xấp xỉ 100bp. Sau khi PCR, em thôi gel lần 1, rồi digest bằng enzym giới hạn mục đích tạo ra 2 đầu dính để sau này cloning và thôi gel lần 2. Nhưng sau 2 lần thôi gel em check lại thì thấy không thu được DNA. Kit em dùng là QIAquick Gel Extraction...

Các bác ơi, em dùng Taq này thì có lúc nhân được gene có lúc thì không. Khi em kiểm tra lại với Taq khác thì lại đều OK. Đảm bảo là em đã kiểm tra rất kỹ thao tác rồi. Các bác có ý kiến giúp em với ạ.:???:

Vector của em khoảng 5kb, insert là 1.1kb ạ. :smile:

Các bác tiền bối ơi, em chót chọn AflII là một trong 2 enzym để digest vector và insert, song lại thấy phân đoạn được cắt bằng enzym này thường cho hiệu suất ligate không cao. Vậy em có nên dùng không hay là nên thay bằng enzym khác? :cry: ___________________________________ HÃY ĐAM MÊ VÀ...

Cái băng đó em load 10ul từ tổng thể tích 50ul ạ. Có lẽ em thử phản ứng PCR nốt 1 lần nữa cho chót xem sao. __________________________ HÃY ĐAM MÊ VÀ BIẾN NIỀM ĐAM MÊ ẤY THÀNH SỰ THẬT ! Hãy lắng nghe tiếng nói của lòng đam mê, hãy chắp đôi cánh cho tâm hồn bay bổng; và hãy để bài hát nào cũng...

Các bác vào đây giúp em một tay với. Em chạy PCR nhân lên đoạn dài 1kb mục đích để thôi gel lấy đoạn này rồi cắt bằng enzym giới hạn và sau đó ligate vào vector. Vấn đề là em PCR mãi mà sản phẩm vẫn smear và band không thật rõ. Vậy nếu em cố elute cái băng này thật chính xác thì liệu em có thể...

Ảnh của em đây ạ.

Cảm ơn các bác đã gợi ý. Em cũng vừa thử điện di mồi (trộn mồi xuôi với mồi ngược) thì thấy băng cũng giống như mẫu PCR của em mới lạ chứ. Chắc tại gel em phân tách chưa tốt. Thực ra gene em cần nhân là 84bp (mồi PCR có chèn đoạn giới hạn nên mới thành 100bp). Thôi thì em sẽ cố làm lại xem rốt...

Chứng âm của em gồm mồi, Taq pol, dNTP, đệm (nói chung có đủ cả chỉ thiếu khuôn thôi). Em dùng 100bp DNA ladder. Cặp mồi này là em chạy thử lần đầu tiên ạ, nên em mới không chắc. Sorry, em chưa biết cách post hình ảnh lên ạ. Nói chung 2 băng giống y nhau giống gần trùng với vạch 100bp ạ.