Mình có thử làm đột biến điểm dựa theo QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit (Stratagene) và thấy một số chú ý bổ sung thêm:
- Sử dụng proofreading DNA polymerases (như Pfu...) để tránh tạo đầu thừa và hạn chế đột biến ngoài ý muốn
- Số chu kỳ PCR nên giảm thiểu
- Plasmid khuôn nên có kích...
Một khía cạnh khác của RNA interference:
Vasudevan S, Tong Y, Steitz JA. Switching from repression to activation: microRNAs can up-regulate translation. Science. 2007 Dec 21;318(5858):1877-8.
1. Chuyển vector có f1 ori vào E. coli (có F' epi)
2. Gây nhiễm E. coli bằng phage phù hợp
3. Nuôi E. coli để tổng hợp ssDNA => tách
4. Tạo đột biến, thường sử dụng primer
Vector của bác sử dụng cho tế bào động vật, theo em hiểu T7 pro được dùng để biểu hiện gen sơ bộ, kiểm tra trước trong E. coli chẳng hạn. Giống như phage, với F1 ori ta có thể tạo ra DNA mạch đơn, thường sử dụng trong việc tạo đột biến.
Giá thế còn đắt đấy :D, những ai gửi mẫu lẻ kiểu sinh viên làm thực tập tốt nghiệp, bên mình không tính tiền :p. Bên mình không làm dịch vụ, giúp đỡ và giao lưu là chính thôi nên giá đưa ra chẳng có ý nghĩ gì.
Công nhận giờ bắt đầu thì từ cái đơn giản cái đã.
Theo em biết hiện nay người ta dùng kỹ thuật chuyển gen để nhân bản một gen thành nhiều trong genome ở vi khuẩn chẳng hạn. Như thế có được gọi là GMO không nhì? Còn ở thực vật, các yếu tố "gen nhảy" được sử dụng để chuyển gen, thì phát hiện và...
1. Nhiều hơn cách làm bình thường một đống thứ thì gọi là phức tạp.
2. Thầy em kể: ngày xưa lab thầy, hàng năm, cứ phải mời một chú người Hàn sang để biểu hiện protein XXX. Chủng có, thiết bị hóa chất đủ, người thì thừa, nhửng chỉ có chú Hàn biểu hiện được, thế mới lạ.
"Nhìn chung". ngoài 2 tín hiệu (signal) như đã kể trên, việc hoạt hóa CD4+ còn cần tới tương tác giữa CD40 (trên MHC) với CD40 Ligand (trên CD4+). Sự hình thành phức CD40-CD40L sẽ kích thích tạo nhiều liên kết B7-CD28 hơn.
B7~CD80/CD86
Hình tham khảo cho dễ hình dung:
http://www.nature.com/ncprheum/journal/v2/n12/fig_tab/ncprheum0345_F1.html
Nhìn chung, để tế bào T CD4+ chuyển sang dạng hoạt động, các receptor của nó (TCR, CD28) cần có 2 tương tác:
1. TCR liên kết với MHC
2. CD28 liên kết với CD80/CD86
MHC và CD80/CD86 tồn...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.