sinhvienhanoi
Senior Member
nếu bạn dọc kỹ về GST purification sẽ thấy rằng urea or other denaturants that used in disrupting your inclusion bodies will also denature your protein, and the GST tag needs to be folded properly in order to work ( to bind to glutation ligand). His tags are better. Cá nhân tôi đã làm một systematic comparation of two collumn và thấy cũng cố kết luận GST fusion foolowed by inclusion body formation is refoldable and purifyable but much less eficient than chelating column
bạn có thể tham khảo paper này mô tả improvement of nikel column
http://www.nature.com/nmeth/journal/v6/n7/full/nmeth0709-477.html
Khi làm với inclusion body bản không cần thiết phải follow các protocol dai dòng làm gi mà chỉ cần spin down your bacteria and put it dỉectly to 8M urea containg buffer (25oC for atleast 4hrs)rồi, sonify, spin down, collect supernatnt va sử dụng nikel column để tinh chế protein cua ban từ cai lysate này. nó sẽ work out pefect!
bạn có thể tham khảo paper này mô tả improvement of nikel column
http://www.nature.com/nmeth/journal/v6/n7/full/nmeth0709-477.html
Khi làm với inclusion body bản không cần thiết phải follow các protocol dai dòng làm gi mà chỉ cần spin down your bacteria and put it dỉectly to 8M urea containg buffer (25oC for atleast 4hrs)rồi, sonify, spin down, collect supernatnt va sử dụng nikel column để tinh chế protein cua ban từ cai lysate này. nó sẽ work out pefect!
