Hỏi về quá trình tách chiết ADN tổng sổ

nguyenhuong89

Junior Member
Em là thành viên mới của diễn đàn... Có 1 vấn đề muốn hỏi các anh chị
Em đang tiến hành tách ADN tổng số từ mẫu máu và mẫu mô. Mẫu máu được lấy từ bệnh viện đại học Y, đựng vào ống EDTA có kí hiệu ngoài là K3 EDTA đủ chống đông từ 2 -5 ml máu.Nhưng khi tiến hành rửa bằng PBS thu cặn tế bào thì không thu được cặn, mà chỉ thu được ở đáy ống 1 dạng dịch lỏng. Em đã thử sử dụng hóa chất của các anh chị khác để tách nhưng vẫn không thu được cặn.
SAu đó em lấy mẫu máu trực tiếp và thử tách thì thu được cặn tế bào. Em muốn hỏi các anh chị 1 chút là:
- Hàm lượng EDTA quá cao có gây ảnh hưởng đến quá trình li tâm thu cặn tế bào không? Vì mỗi lần lấy máu chúng em chỉ có thế lấy được từ 0,5 - 1,5 ml/ 1 ống máu
- Nếu có ảnh hưởng thì khi lấy máu chúng em nên sử dụng ống chống đông nào với hàm lượng bao nhiêu?
Rất mong nhận được sự giúp đỡ của các anh chị!!!:oops:
 
Khi ly tâm thu cặn chúng em thu được 3 lớp:
- Lớp lỏng bên trên
- Lớp lỏng nhưng đậm màu hơn, mỏng hơn nằm ngay trên lớp cặn
- Lớp cặn ở bên dưới tương đối chắc bám vào đáy ống.
Nhưng với mẫu máu hiện có, khi li tâm chúng em chỉ thu được 2 lớp, không có lớp cặn đáy. Nên em thắc mắc không rõ nguyên nhân tại sao:???:
 
ly tâm trong điều kiện như thế nào? mẫu máu khi chống đông được giữ trong điều kiện ntn? bao lâu thì được dùng để tách DNA?
 
Mọi người tư vấn giúp e với chuẩn bị thi sinh học phân tử: chất chống đông EDTA có tác dụng gì trong tách DNA ạ ? e xin cảm ơn ạ.
 

Facebook

Thống kê diễn đàn

Threads
12,995
Messages
72,869
Members
45,065
Latest member
Go88aa
Back
Top