Giữ streaking plates trong bao lâu?

[Nguyễn Ngọc Lương]

Chào các bạn làm SHPT.
Mình có vấn đề này muốn hỏi. Mình chưa hình thành thói quen làm xong construct nào ổn là trữ luôn vào -80. Mình thường làm streaking plates rồi cất tủ 4C, đợi đến khi mọi thứ OK toàn bộ mới trữ. Mình muốn hỏi tế bào trên dĩa streak có thể sống được trong bao lâu? Nghe mấy người trong lab bảo E.coli thì thường khoảng 1-2 tháng. Mình thấy nếu để khoảng trên 3 tháng thì khi inoculate vào LB broth gần như tế bào chết sạch (12 tiếng mà vẫn chưa thấy môi trường đục).
Cám ơn!

 

[Cao Xuân Hiếu]

Tôi nghĩ giờ bác phải thay đổi thói quen là tốt nhất. Làm được construct sau khi sequencing xong thì giữ -80oC. Cái này vừa nhanh, cất gọn gàng và bảo quản lâu. Giữ trên đĩa thạch không quá được 2 tháng. Thời gian thực phụ thuộc vào genetic background của chủng VSV, số lần mở đĩa, đĩa có bị đóng nước hay bị khô không. Nói chung rất nhiều yếu tố làm giảm tuổi thọ/ sức sống của chủng ở 4oC. Các kết quả thí nghiệm trên đĩa mới và đĩa cũ có thể khác nhau. Do đó thường mỗi lần phenotype assay thì tôi đều phải làm fresh plate từ glycerol stocks.

Regards,

 

[Lê Đức Dũng]

Chào các bạn làm SHPT.
Mình có vấn đề này muốn hỏi. Mình chưa hình thành thói quen làm xong construct nào ổn là trữ luôn vào -80. Mình thường làm streaking plates rồi cất tủ 4C, đợi đến khi mọi thứ OK toàn bộ mới trữ. Mình muốn hỏi tế bào trên dĩa streak có thể sống được trong bao lâu? Nghe mấy người trong lab bảo E.coli thì thường khoảng 1-2 tháng. Mình thấy nếu để khoảng trên 3 tháng thì khi inoculate vào LB broth gần như tế bào chết sạch (12 tiếng mà vẫn chưa thấy môi trường đục).
Cám ơn!

thường thì giữ được 4-6 tuần, tốt nhất trước khi cất đĩa vào tr lạnh thì nên lấy băng dính hay membran dính mép của đĩa lại...

 

[Cao Xuân Hiếu]

thường thì giữ được 4-6 tuần, tốt nhất trước khi cất đĩa vào tr lạnh thì nên lấy băng dính hay membran dính mép của đĩa lại...

khi đó nên để đĩa úp hay ngửa?

 

[Nguyễn Ngọc Lương]

Các bạn thử lý giải các nguyên nhân để úp dĩa?
1. Tránh nước đọng rơi vào khuẩn lạc.
2....
3....

 

[Lê Đức Dũng]

khi đó nên để đĩa úp hay ngửa?

hè hè em chả bao giờ để đĩa ngửa, kể cả khi mới đổ xong, rồi bảo quản cũng úp, khi incubate cũng úp, tóm lại đời nó suốt đời nằm úp..chỉ khi mình làm việc nó mới dược ngửa.