Follow along with the video below to see how to install our site as a web app on your home screen.
Note: This feature may not be available in some browsers.
Chỉ rất ít máy PCR dùng giá nhựa để xếp ống PCR vào block nhiệt. Hiệu quả của giá nhựa thể hiện rõ nhất khi tối ưu phản ứng PCR.
Mình đã chạy 7,5 ul phản ứng, nhưng chắc do hoá chất dùng nghiên cứu từ nhiều hãng (để tiết kiệm chi phí mà) nên không dám để thể tích thấp hơn 10 ul.
Thế mà hôm rồi nghe có phòng thí nghiệm làm phản ứng với 5 ul
Choáng luôn.
Chỉ rất ít máy PCR dùng giá nhựa để xếp ống PCR vào block nhiệt. Hiệu quả của giá nhựa thể hiện rõ nhất khi tối ưu phản ứng PCR.
Mình đã chạy 7,5 ul phản ứng, nhưng chắc do hoá chất dùng nghiên cứu từ nhiều hãng (để tiết kiệm chi phí mà) nên không dám để thể tích thấp hơn 10 ul.
Thế mà hôm rồi nghe có phòng thí nghiệm làm phản ứng với 5 ul
Choáng luôn.
Nhanh nhất là thiết kế lại 3 mồi chạy cùng một nhiệt độ.a chị e làm nhiều về PCR cho e hỏi chút...
Trong phương pháp Multiplex PCR e muốn nhân dòng 3 đoạn ADN có nhiệt độ gắn mồi khác nhau (vd: 56, 58 và 62 độ) . Bác nào giúp thiết kế chu trình nhiệt của phản ứng PCR đó. Cảm ơn nhiều!
Chỉ rất ít máy PCR dùng giá nhựa để xếp ống PCR vào block nhiệt. Hiệu quả của giá nhựa thể hiện rõ nhất khi tối ưu phản ứng PCR.
Mình đã chạy 7,5 ul phản ứng, nhưng chắc do hoá chất dùng nghiên cứu từ nhiều hãng (để tiết kiệm chi phí mà) nên không dám để thể tích thấp hơn 10 ul.
Thế mà hôm rồi nghe có phòng thí nghiệm làm phản ứng với 5 ul
Choáng luôn.
Em chào các bác,
Em đang thử chạy PCR với cặp mồi mới em tự thiết kế. Các thông số như sau:
- Máy PCR: Agilent Technology
- Enzyme: BioTaq polymerase
- Dung dích phản ứng: 50 microlit
- Target fragment: 3kb
- DNA template ngon lành, vì check không thấy smear, băng đậm.
- Chu trình: 95C – 5’; 95C – 30’’, 55C – 30’’, 72C – 30’’, 72C – 5’, 4C -
Theo thông số của Cty em order mồi, Tm họ đưa ra là 66 độ C, em đã giảm xuống 61 rồi 55 độ C vẫn chưa ăn thua.
Em đang băn khoăn liệu có phải do thao tác em chưa chuẩn!!! Em xin hỏi các bác là khi mình bơm dung dịch vào ống PCR, sau khi bơm thì vẫn còn 1 ít dính vào đầu tip. Em thường nhích thêm 1 chút để đẩy toàn bộ vào ống. Thao tác như vậy có được không? Liệu đó có là nguyên nhân dẫn đến thất bại không?
Theo các bác em cần làm gì bây giờ??? Thay enzyme khác hay Check lại primer....
Rất mong nhận được thông tin từ các bác!
Khi thuc hien "high-throughput" PCRs, cac phong thi nghiem o My va Anh thuong dung the tich 5-ul. Trong cac phong thi nghiem nay, doi khi cac ky thuat vien phai thuc hien >10,000 PCR reactions/ngay. Do vay, ho co the tiet kiem duoc rat nhieu hoa chat va enzyme.
Em co the tham khao them o day:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2490690/
http://nar.oxfordjournals.org/cgi/content/full/31/19/e115
http://www.pnas.org/content/100/6/3059.long