Cố định tế bào.

[nguyennuthanhnhan]

Mọi người ơi! Có ai biết gì về vấn đề cố định tế bào động vật không chia sẽ với mình với! Minh học công nghệ sinh học động vật nhưng thầy nói không được rõ và bài giảng viết cũng không cụ thể và chung chung quá nên lên mạng tìm nhưng không thấy (chắc vì mình không biết cách tìm). Cụ thể là vấn đề về có bốn cách cố định tế bào :
- Gắn lên bề mặt.
- Tạo thể xốp.
- Sử dụng bao vi thể.
- Tự kết khối.
...nhưng nội dung rất khó hình dung nên có anh chị hay bạn nào có quan tâm đến vấn đề này thì giúp dùm mình nha.
Cám ơn nhiều.

 

[nguyennuthanhnhan]

Trời ơi! Cứu tui với mọi người ơi! Sao không ai giúp tui hết vậy!

 

[Nguyễn Thế huỳnh]

Xin cho em hỏi có phải vấn đề chị nêu liên quan đến Sinh trưởng và bất động của tế bào không ạ ?

 

[nguyennuthanhnhan]

Xin cho em hỏi có phải vấn đề chị nêu liên quan đến Sinh trưởng và bất động của tế bào không ạ ?

Trời ơi! Mừng quá cuối cùng cũng có người thương tình mình mà trả lời rồi! Cảm ơn! Cảm ơn!
Ừh! Đúng rồi đó em Huỳnh ơi! Có gì có thể giúp chị được không?

 

[Nguyễn Ngọc Lương]

Cố định tế bào: mammalian cell immobilization
Mục đích: tăng hiệu suất nuôi cấy => nuôi cấy liên tục, bảo vệ tế bào khỏi các lực gây tổn hại do nuôi cấy huyền phù.
Đối với tế bào phụ thuộc bám: gắn vào các microcarrier (xốp/không xốp)=> nuôi cấy huyền phù
Đối với tế bào không phụ thuộc bám: bọc trong màng aginate hoặc "nhốt" tế bào trong các vỏ agarose

 

[nguyennuthanhnhan]

Cảm ơn bạn Ngọc Lương nha!nhưng bạn có thể nói rõ hơn nữa được không?Các lực do nuôi cấy huyền phù là...?tai sao lại nói là nuôi cấy liên tục? Nuôi cấy ở hình thức khác không liên tục sao? Và tế bào phụ thuộc bám và không phụ thuộc bám mình cũng không hiểu. Thật là làm phiền bạn quá nhưng mình thật sự muốn học tốt nhưng lại mất căn bản quá nên Cảm phiền nha!

 

[Nguyễn Thế huỳnh]

Bất động tế bào Phương pháp bất động (immobilization) các tế bào hoàn chỉnh có nhiều ưu điểm hơn các kỹ thuật nuôi cấy truyền thống. Bằng cách bất động tế bào, việc thiết kế quy trình đơn giản hơn khi các tế bào được gắn với các phần tử lớn hoặc trên các bề mặt được phân tách dễ dàng khỏi dòng sản phẩm. Điều này đảm bảo hoạt động liên tục của hệ lên men không bị nguy cơ rửa trôi tế bào. Sự bất động cũng có thể cung cấp các điều kiện có lợi cho sự phân hóa tế bào và sự truyền đạt thông tin giữa các tế bào, bằng cách ấy đã thúc đẩy sản phẩm có sản lượng các chất trao đổi thứ cấp cao. Sự bất động có thể bảo vệ tế bào bằng cách làm giảm các sự cố liên quan tới lực trượt (shear forces) gây tổn thương tế bào. Các phương pháp bất động tế bào có thể được phân chia thành bốn nhóm :
1. Gắn lên bề mặt Các tế bào có thể gắn lên bề mặt của mảnh gỗ nhỏ, collagen, microcarrier, hoặc các nhựa tổng hợp trao đổi ion (resin). Một ví dụ của kiểu bất động này là sử dụng các microcarrier cho các tế bào động vật. Ưu điểm chính của microcarrier là nó cung cấp một diện tích bề mặt lớn để gắn tế bào. Vật liệu cho microcarrier bao gồm các nhựa tổng hợp trao đổi ion, các hạt nhỏ dựa trên cơ sở dextran được bọc bằng gelatin, các hạt polyacrylamide, các hạt polystyrene, các hạt thủy tinh rỗng, các hạt cellulose hình trụ, và các giọt floruacarbon nhỏ được ổn định bằng polylysine. Hiện nay, các microcarrier dựa trên dextran được sử dụng rộng rãi nhất để bất động tế bào động vật.
2. Tạo thể xốp Phương pháp này cho phép các tế bào khuếch tán trong các thể xốp đã có sẵn như cordierite và pore glass (hạt thủy tinh có nhiều lỗ rỗng nhỏ), ở trong đó chúng sẽ sinh trưởng và được giữ lại. Ưu điểm chính của phương pháp này là các vật liệu tạo thể xốp đã có sẵn chống chịu được sự phân hủy trong các bình nuôi có khuấy từ hơn các loại vật liệu tạo thể xốp khác (alginate, acrylamide…), và thể xốp thường không có hại đối với tế bào. Tuy nhiên, phương pháp này gặp khó khăn trong việc hướng tới nồng độ cao của tế bào do thể tích lỗ thủy tinh (pore) bị giới hạn bởi chúng được làm sẵn bằng các loại vật liệu tạo thể xốp đặc trưng. Một phương thức khác là bọc các tế bào bằng thể xốp được tạo dung dịch calcium chloride. Các hạt được tạo thành ngay tức thời có đường kính từ 1-5 mm tùy thuộc vào nồng độ tế bào và alginate của dung dịch và kích thước của mũi kim tiêm. Cần lưu ý thêm là phải duy trì sự vô trùng trong suốt quá trình bất động tế bào. Nhược điểm chính của việc sử dụng alginate để bất động tế bào là để lọt các tế bào từ sự phân chia tế bào xuất hiện bên trong các hạt riêng rẽ. Việc lọt tế bào có thể được giảm thiểu hoặc bằng cách tăng nồng độ của alginate hoặc calcium chlorite trong các hạt hoặc bằng cách tạo ra các hạt nhỏ. Tuy nhiên, việc tăng nồng độ của alginate hoặc calcium chloride trong hạt có thể làm giảm tốc độ khuếch tán cơ chất thông qua gel và có thể ảnh hưởng đến khả năng sống sót của các tế bào được bao bọc.
3. Sử dụng bao vi thể Các tế bào có thể được bất động bằng các bao vi thể (microcapsule) có màng hoặc màng bán thấm không cố định hoặc cố định. Ưu điểm của kỹ thuật đóng vỏ bao là tạo một diện tích bề mặt lớn cho sự tiếp xúc của cơ chất và tế bào. Màng bán thấm chỉ cho đi qua một cách chọn lọc những thành phần có trọng lượng phân tử thấp. Các màng dạng sợi rỗng tạo thành một cấu trúc hình ống thường được sắp hàng như là các bó sợi song song bên trong một buồng hình trụ. Các tế bào được giữ lại trên thành của các sợi rỗng trong khi môi trường dinh dưỡng được thông khí luân chuyển quanh các sợi. Loại màng này có thể cung cấp thêm sự bảo vệ chống nhiễm bẩn môi trường. Tuy nhiên, nhược điểm chính của hệ thống màng này là giá thành cao,ự tắc nghẽn của màng đã làm trở ngại cho việc chuyển khối và gây khó khăn trong việc thông khí.
4. Tự kết khối Các tế bào tự kết khối hoặc kết thành cụm như len cũng có thể được xem như là các tế bào được bất động do kích thước lớn của chúng có ưu điểm tương tự như sự bất động bằng các phương pháp khác. Trong khi nấm mốc sẽ tạo ra các tiểu thể tự nhiên, thì các tế bào vi khuẩn hoặc nấm men lại cần đến sự kết cụm. Các nhân tố kết thành cụm nhân tạo hoặc các nhân tố liên kết ngang (cross-linkers) có thể được bổ sung để tăng cường quá trình.
Em sưu tầm được mấy cái này , không biết có phải cái chị đang cần không

 

[nguyennuthanhnhan]

Em Thế Huỳnh thân mến! Em ơi sao em có được tài liệu này? Đây chính là tài liệu mà chị có được từ giảng viên của chị đó. Đọc xong em có hình dung được gì không chứ chị thì còn thắc mắc nhiều lắm. Không rõ ràng gì hết. Nhưng cũng cảm ơn em vô cùng nha!