What's new

Ligation

Ligation- sửa lại

Cả nhà xử lí hộ em cái vụ này với ạ.
Cái insert(gen) của em nó dài tận 4316bp nhưng mà empty vector em dùng là pENTR dài có 2580bp thôi. Em ligation mãi mà không được. Em thử với các trường hợp:
Nhiệt độ cho pư ligation em dùng là 28oC
Thời gian: 3h và overnight
Thành phần của p ứ lai là :
Elution product(gen): 3
Salt solution: 0.5
TOPO vector : 0.5
TH khác:
Elution product( gen): 4
Salt solution: 1
TOPO vector : 1
(đơn vị tính: micromol)
Nhưng kết quả sau ligation vẫn chưa thấy có sự gắn gen vào vector.
Cả nhà cho em xin vài ý kiến với ạ. Thanks cả nhà.
Em đã thử 25oC rồi mà cũng ko khả thi.
Nếu ace ko có ý kiến gì về TH của em thì cho em xin hỏi các yếu tố ảnh hưởng đến pư gắn gen vào vecto đc ko ạ. em cảm ơn ạ
 

Facebook

Top