Search results

Bạn nên post ảnh gần đây bạn làm bị lượn sóng. Bạn thử thay lại hóa chất đổ gel đi. Cái APS nên pha mới mỗi lần đổ gel hoặc chỉ pha cho vài lần dùng. Trộn đều trước khi bơm vào kính. Kính và dụng cụ đổ gel nên rửa sạch, tráng nước cất. Ảnh điện di cũ của bạn rất đẹp, nếu vẫn là mẫu đó thì không...

Hồi đó mình dùng bộ kit cloning, sử dụng một vector nhỏ, blunt 2 đầu nên chỉ cần dùng 1 ul của sản phẩm PCR, xử lý với enzyme blunt để ligation đã lên rất nhiều khuẩn lạc rồi. Sau đó thích đem cái vector đó đi cắt ghép gì sang vector khác cũng đơn giản. Đó là giải pháp cloning mà mình thấy khá...

- Sau khi hấp tiệt trùng xong em bỏ vào tủ sấy cho khô. Để hạn chế hơi nước em có thể bọc giấy bên ngoài hộp - Chứng dương là để test hóa chất: Taq, h2o, dnpts, buffer, primers, chế độ chạy của máy, nên người ta dùng DNA khuôn đã biết chắc là cho kết quả dương tính. Ngoài mẫu đã lên, nếu chỉ để...

Cái vấn đề này, trong trường hợp của mình, đơn giản là do enzyme taq hoạt động không hiệu quả. Thường thì master-mix chỉ sử dụng được trong thời gian ngắn và không được tốt bằng sử dụng taq riêng, và còn phụ thuộc hãng nữa. Hai nữa là tùy thuộc vào khuôn và mồi mà phản ứng PCR dễ hay khó, do đó...

Mình đã hoàn thành thí nghiệm và viết lại để các bạn cùng biết. Theo các nghiên cứu thế giới và thực tế kinh nghiệm của mình thì với vật chủ là B. megateirum nếu thực hiện biến nạp bằng xung điện sẽ không thành công. Mình đã làm biến nạp bằng tế bào trần, phương pháp đơn giản là xử lý lisozyme...

Gõ lại cuốn sách dày vậy, còn cần chỉnh font... sẽ mất rất nhiều thời gian và vi phạm bản quyền, chỉ để tra từ chuyên ngành cho nhanh, trong khi mình cũng không dùng nhiều từ lắm hoặc có nhiều cách khác. Hoặc bạn dùng phần mềm chuyển từ file ảnh sang word. Nếu không được thì mất khoảng 30s để...

Bạn liên lạc tới các nơi lưu giữ chủng như: Bảo tàng giống chuẩn Quốc Gia xem có không. Có trang web đó bạn. http://imbt.vnu.edu.vn/vi/ptn_vn_btg_vsv

Anh/chị/ bạn cho mình hỏi, mình đang biểu hiện một enzyme trên Bacillus. Khảo sát sự biểu hiện theo giờ thì hoạt lực enzyme tăng rồi giảm rất nhanh, đồ thị đi lên rồi lại đi xuống, lặp đi lặp lại. Theo mình thì enzyme đã bị protease ngoại bào của chính vật chủ phân hủy hết. Chủng mình dùng biểu...

Giá trị OD 600 khi thu tế bào làm tế bào khả biến Một vấn đề nữa là giá trị OD 600 khi thu tế bào làm tế bào khả biến có cần chính xác là 1-2 theo protocol hướng dẫn không? nếu em lỡ nuôi vượt quá giá trị này, lên khoảng 2,5; 3 chẳng hạn thì có ảnh hưởng không tốt gì đến hiệu quả biến nạp...

Một bài báo về biến nạp bằng xung điện Bacillus megaterium Bài này nói hiệu suất max đạt được là 10^3CFU/ug

Cảm ơn anh Cfareast đã giúp đỡ. Theo một bài báo em đọc (file đính kèm) thì hiệu suất cao nhất người ta đạt được chỉ khoảng 10^3 CFU/ug DNA, vậy mà theo anh là 10^5-6 CFU/ug. Anh có thể gửi em protocol đã từng làm qua đây hoặc email: tuyetnhung0608@gmail.com được không? Khi anh làm xung điện thì...

Các bác Nguyễn Xuân Hưng, Nguyễn Ngọc Lương, Cao Xuân Hiếu... Anh chị em sinh học không lẽ chưa ai từng làm với Bacillus hay gram + ạ? Mong anh/chị nào biết sớm lên tiếng, đề xuất phương pháp biến nạp hiệu quả hơn hoặc chú ý khi biến nạp vào Bacillus. Hoặc gửi link tài liệu có liên quan. Em cảm ơn!

Mình có dùng Tetracycline nhưng không phải để cảm ứng mà để chọn lọc dòng mang vector và dòng không, cũng chưa từng đọc tài liệu cảm ửng bằng Tetracycline. Tuy nhiên dùng kháng sinh này mình pha trong cồn 70%, nồng độ 0,01g/ml voltex hoài mà không thể tan hết, không biết bạn làm cách nào tan...

Thân gửi các anh chị. Mong anh chị nào đã từng làm biểu hiện trên Bacillus hoặc vi khuẩn Gram+ chia sẻ kinh nghiệm. Hiện tại em đang thực hiện biểu hiện một gen trên Bacillus, cụ thể là B. megaterium. Vấn đề em gặp phải ở đây là không thể biến nạp vector vào vật chủ được. Vector sử dụng ở đây là...

Mình đã chạy gradient nhiệt độ, không có sự khác biệt nhiều ở các giải nhiệt độ khác nhau. Ảnh đính kèm là sản phẩm PCR mình thu nhận được đó (bên cạnh marker), load 5ul/giếng. Dựa vào marker thì suy đoán nồng độ PCR vào khoảng 20ug/ul. Vậy có đủ dùng bước cắt enzyme giới hạn tiếp theo không?

Anh giải thích rõ hơn "Chạy đối chứng nội và đối chứng dương" cho em được không. Em chạy 16s vẫn lên bình thường, tuy không được sáng rõ. Mastermix thì trong phòng anh chị làm đề tài khác vẫn lên.

Chắc chắn không phải do thao tác rồi, vì lặp đi lặp lại kết quả vẫn thế, thay người khác làm cũng vậy. Em nghĩ đau đầu mà không hiểu tại sao rồi :( Nguyên nhân nhiều nhất chỉ có thể là mồi hoặc khuôn. Hoặc cái gen cần tách nó biến đi đâu mất rồi. Liệu có phải do sử dụng chủng B. subtilis cấy...

Em đang gặp rắc rối trong bước đơn giản nhất là PCR, các anh chị giúp em giải quyết nhé. Em thực hiện PCR mồi đặc hiệu câu một gene 1,1 kb từ B. subtilis. Đầu tiên nuôi chủng trên LB, tách thu DNA, điện di một band sáng, độ tinh sạch A260/280 = 1,9. Nồng độ DNA đo bằng nanodrop khoảng 100 ng/ul...

Anh cho em địa chỉ email liên hệ được không. Nhung. tuyetnhung0608@gmail.com

hi, thế sư tỉ nào đây ạ ? :)