Em đang thiết kế mồi để phân lập một gen gần 3,5 kb từ cDNA của thực vật ( Genomic sequence của gen gần 9 kb quá dài nên em phải dùng Transcript sequence)
Sau khi tìm kiếm thông tin về gen, em có trình tự Transcript sequence như trong file đính kèm. Do ko có vùng 5'UTR nên em bắt buộc phải dùng...
Trời. Cái vụ DNA polymerase cho PCR thì phòng công nghệ tế bào thực vật - vcnsh sản xuất dc. Giá rẻ lắm hình như chỉ bằng 1/2 của hãng rẻ nhất thôi. Mà dùng cũng tốt lắm. Ai cần thì liên lạc với anh Hà theo email pcbhoangha@gmail.com. Anh ấy còn có cả kit pBT dùng cho tách dòng nữa. Phòng này...
Cảm ơn bạn. Trước giờ trên lab mình cũng có một số người trước khi trải đĩa cũng ly tâm để concentrate tế bào nhưng mình chưa thử bao giờ vì trải bình thường khuẩn lạc cũng nhiều lắm rồi. Nhưng thật sự trong trường hợp hiệu suất ligation thấp như thế này, chiến thuật đó theo mình thử thì khá...
Cảm ơn bạn. Thiết kế của mình dùng binary vector. Nhờ những kinh nghiệm quí báu mà các bạn chia sẻ và cũng có phần may mắn, tuần vừa rồi mình đã hoàn thành việc thiết kế rồi, bây giờ đang chuẩn bị biến nạp vào Agrobacterium và chuyển gen vào cây.
Mình sắp phải thiết kế một vector biểu hiện trong thực vật (kích thước vector là 9,5 Kb) nhưng kích thước đoạn DNA cần insert vào khá lớn (> 3 Kb) nên có thể quá trình ligation sẽ gặp khó khăn. Anh chị em nào đã từng giải quyết vấn đề tương tự như vậy xin chia sẻ kinh nghiệm.
Chân thành cảm ơn...
Em mới làm quen với nuôi cấy mô thực vật nên còn nhiều điều chưa hiểu, mong cả nhà giải đáp giúp:
Theo em được biết khi thiết kế cấu trúc để chuyển gen vào thực vật người ta thường thiết kế kèm các gen chỉ thị, trong đó có gen kháng kháng sinh để giúp cho việc chọn lọc sơ bộ: những cây nào sống...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.