Về vấn đề kích thước giống nhau thì không đúng bạn ạ. Bạn đọc kỹ lại cái probe và enzyme dùng để cắt genomic nhé. Ví dụ gene pta nằm giữa 2 vị trí cắt SmaI nhưng enzyme dùng để cắt genomic DNA trong phân tích Southern cho gene này là HindIII. Điều này có nghĩa là 1 vị trí cắt sẽ nằm trong vùng...
Nguyên tắc tránh nhiễm là tủ cấy không được chật chội. Bạn làm nhiều thì bị nhiễm là phải rồi. Nếu tỉ lệ nhiễm nhỏ thì tạm chấp nhận thôi.
Nên dùng các dung dịch khử bào tử nấm trong không gian làm việc. Ví dụ foc-mon, 2% Roccall hoặc 1% đồng sunphat.
Về đồ dĩa thạch thì mình thấy để khoảng 1-2...
Sản xuất polyclonal antibody từ chuột Balb/c:
+ Mua chuột 4 tuần tuổi về cho nghỉ ngơi 2 ngày.
+ Tinh sạch antigen biểu hiện ở E.coli
+ Thẩm tích mẫu tinh sạch bằng nước cất vài lần (thể tích bên ngoài gấp khoảng 1000 lần)
+ Ly tâm thu tủa protein (vì protein bị biến tính nên trong nước cất...
Thao tác với sequence:
Trên mạng có nhiều web-based software nhưng mình chỉ sử dụng một số trang web sau để thao tác sequence:
+ nebcutter: dùng để cắt trình tự của mình đã có bằng các enzyme có bán trên thị trường
+ expasy tools: gồm có công cụ dịch mã, tính toán Ip và trọng lượng phân tử
+...
Tiếp tục chia xẻ...
Biến nạp và screen thể biến nạp E.coli:
+ Nhặt khuẩn lạc khả nghi làm replica plate và nuôi vào 1ml LB bổ sung kháng sinh trong tube Eppendorf 1.5ml. Đem nuôi 6-9 tiếng (ví dụ 10 h nuôi thì 5h chiều bắt đầu thu hoạch là vừa).
+ Chia 1 ml thành 2 tube Eppendorf mỗi tube 500...
Hehe, like mạnh. Có lần chạy khoảng 60 cái PCR. Làm cái master mix xong phân bổ vào các tube PCR thì tự dưng thấy thiếu. Tính toán lại hóa ra tính lượng nước sai. Kết quả: bay 1 tube Taq :mrgreen:
Tự an ủi với lương tâm: mình đang phá hoại sự phát triển của bọn tư bản, tức là giúp cho nước nhà.
Tiếp tục chia xẻ...
Kỹ năng này để tìm...học bổng :dance:
Giả dụ người yêu bạn ở thành phố Paris xinh đẹp, ở trường Paris VI chẳng hạn
Vào pubmed bạn đánh lĩnh vực bạn quan tâm, ví dụ apoptosis, và tên thành phố Paris, rồi sử dụng toán tử tìm kiếm:
apoptosis [TIAB] Paris [AD]
Nó sẽ ra cho bạn...
Tiếp tục chia xẻ...
Khi dùng pepitte để trộn, bạn nên thay đầu tip khi muốn hút mẫu, vì trước đó khi bạn trộn vô tình bạn nhấn quá mức 1 của pepitte và như vậy khi hút bằng pipette tip đó thể tích sẽ thay đổi một chút so với thể tích bạn mong muốn. Ngoài ra khả năng bạn sẽ không thể dispense...
Có lẽ việc tắt UV sớm trước khi vào làm việc là để tránh ngửi phải khí ozone (thường tạo thành do ion hóa oxy). Có lẽ bước này hơi "cẩn thận" quá chăng vì thường các lab các nơi khác đều không phổ biến 'phong tục' này.
Còn về việc SV vào làm khi người khác đang phơi khô môi trường là điều cấm...
Quat cleanbench không có tác dụng khử trùng. Nó chỉ có tác dụng lưu khí khử trùng trong tủ và tạo ra áp suất để khí bên ngoài không vào được thôi.
Có thể lab tôi làm nấm nên phải cẩn thận thế. Thường thì bị nhiễm nhiều nhất là nấm chứ không phải nhiễm khuẩn vì nói chung khó thấy vi khuẩn nhiễm...
Nếu nuôi E.coli và nấm men thì không sao. Nhưng nếu nuôi các nấm sợi thì người ta sợ thay đổi thành phần dinh dưỡng làm ảnh hưởng đến phenotype của nấm.
Thật ra thì tôi nghĩ UV khử trùng bằng ion hóa oxy thành ozone và ozone diệt vi khuẩn, hoặc gây đột biến DNA khiến vi khuẩn không thể sinh sôi...
Ở lab mình dĩa thạch nuôi E.coli, Nấm men và nấm sợi đều đổ ở trong cleanbench, để khô trong 1-2 ngày rồi cất tủ lạnh dùng dần. Tùy vào đk lab mà cleanbench có thể là tủ cleanbench hoặc có thể là lab bench.
Tiếp tục chia xẻ:
Loại muối: nếu bạn phải tủa protein bằng ammonium sulfate, một lượng...
Mở topics này để mọi người chia xẻ kỹ năng khi làm SHPT cái nhỉ.
Nói chung kỹ năng SHPT thường nằm ở những điểm rất nhỏ, thuộc về sự khéo léo và kinh nghiệm trong lab chứ không đề cập trong sách vở. Chính vì vậy nên tôi muốn mở topic này để mọi người đã từng làm SHPT vào chia xẻ để các bạn sắp...
Câu này thật là lưỡng nghĩa:
+ Nhưng thôi dù sao cũng là đồng môn nên anh tha cho lần này
+ Nhưng châm chước dân BK là dân kỹ thuật, không biết bố trí thí nghiệm thế nào nên anh chỉ cho mà biết :smile:
Nhớ là nuôi cùng đk nữa :), tức tất tần tận PC, NC và mẫu cùng làm trong 1 đk.
Mình nuôi nấm men (lên men bánh mì) ở 20 và 30 độ, protein pattern khác hẳn nhau. Thậm chí cùng 1 lượng tế bào, lượng protein tách ra ở 20 độ cũng khác 30 độ.
Về biểu hiện ở E.coli mình còn thấy hiện tượng tăng kích...
Đọc mấy bài này phải đọc với tinh thần đọc báo lá cải VN, dù nó có gắn các mác to tướng Editorial, và ở tận...Nature journal. Kể cả người viết là người trong ngành đi nữa. Những bài này không thể khuyên người ta đừng học PhD, hay những người đang học PhD hãy bỏ đi kẻo lãng phí thời gian.
Ví dụ...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.