Molecular diagnostic

[Bùi Anh Tuấn]

Chào các đại ca, topic này đã từng được đề cập chưa, nhưng em vẫn xin mạo muội nêu ra để tiếp kiến các đại ca. Thời gian này em đang cố tìm hiểu về một quy trình chẩn đoán phân tử (có sử dụng các kỹ thuật phân tích real-time, end-point determination) trong chẩn đoán phát hiện nhanh (possitive/negative detection) một số bệnh do tác nhân vi rút hoặc vi khuẩn.
Ai có kinh nghiệm về setup một hệ thống này đòi hỏi những thiết bị này và các nguyên tắc chung của quy trình này là gì.

Mong các đại ca cho y kiến.

 

[Bùi Anh Tuấn]

CÔNG NGHỆ CHẨN ĐOÁN PHÂN TỬ TRONG PHÁT HIỆN H1N1


Cuộc cách mạng trong các xét nghiệm phát hiện nhanh mầm bệnh virus cúm H1N1- sử dụng công nghệ chẩn đoán phân tử trên que thử nhanh.

Hệ thống que thử nhanh The rapidSTRIPE được phát triển trở thành một phương tiện chẩn đoán cực nhanh, đặc hiệu và hiệu quả đối với các tác nhân gây bệnh là vi khuẩn, virus hay động vật nguyên sinh khác. Với cấu trúc module trong hệ thống phát hiện nhanh nhờ que thử kết hợp tất cả các bước của quy trình chẩn đoán phân tử:
-Tách chiết acid nucleic
-Khuêch đại gen
-Phát hiện các acid nucleic đích.
Phụ thuộc vào mục đích chẩn đoán, sẽ có những bộ kít được tối ưu hóa cho quá trình tách chiết vật liệu di truyền sử dụng cho RapidStrip. Công nghệ tách chiết cực nhanh và hiệu quả DNA, RNA hoặc đồng thời cả hai, sử dụng công nghệ mới nhất trên thế giới đem lại chất lượng Acid nucleic tuyệt hảo tạo điều kiện tối ưu cho các phân tích tiếp theo.
Sau quá trình tách chiết tinh sạch acid nucleic, các acid nucleic đích sẽ được khuêch đại đặc hiệu sử dụng công nghệ nhân gen siêu tốc: RapidPCR trên thế hệ máy chu trình nhiệt siêu tốc: Speed Cycler2 hoặc Alpha SC từ hãng AnalytikJena- Đức.
Phản ứng khuêch đại được kết hợp với một phản ứng lai giữa các sản phẩm khuêch đại với một mẫu dò đích có trình tự đặc hiệu. Phản ứng lai được kết hợp và xảy ra trong cùng một ống tube phản ứng.
Dạng phản ứng mới lạ chờ được cấp bằng sáng chế này cho phép xác định nhanh và chính xác các acid nucleic đích và ngăn ngừa hiện tượng âm tính giả.
Sự phát hiện của các phản ứng khuêch đại được tiến hành trên một que thử lateral flow stripe (LFS) chỉ bằng cách chuyển hỗn hợp khuêch đại lên trên bề mặt que thử mà không cần bất kỳ thao tác nào thêm.
Kết quả test có thể được nhìn thấy bằng mắt thường trong thời gian vài phút dưới dạng một vạch màu test và một vạch đối chứng để đàm bảo kết quả xét nghiệm là chính xác.
Hệ thống que thử rapidSTRIPE có thể được tiến hành từ bước khởi đầu là tách chiết acid nucleic với chất lượng và độ tinh sạch cao và kết thúc bằng việc xác định một hoặc là nhiều mầm bệnh.
Quan trọng hơn hết là kỹ thuật phát hiện mầm bệnh sử dụng que thử này cực kỳ đơn giản và dẽ dàng thực hiện trong thời gian rất ngắn so với các phương pháp phát hiện thường quy khác. Điều này có ý nghĩa rất lớn trong công tác điều trị và khống chế sự lây lan của mầm bệnh trong cộng đồng.Tổng thời gian cho việc khuêch đại và phát hiện diễn ra chỉ trong thời gian 01 giờ đồng hồ.
Kỹ thuật chẩn đoán phân tử này, hiện nay đã được nghiên cứu và phát triển để ứng dụng trong phát hiện nhanh nhiều loại mầm bệnh trên các đối tượng khác nhau ở cả người và động vật. Một số mầm bệnh là :
-Phát hiện mầm bệnh là virus cúm trên người và động vật (H1N1, H5N1,…)
-Phát hiện Rickettsia, Borrelia, FSME virus, EhrlichiaBabesia, Anaplasma trên vật truyền bệnh là con bọ ve.
-Phát hiện các mầm bệnh trong thực phẩm như: Vi khuẩn Salmonella , Listeria và các loại vi sinh vật gây bệnh khác
-Phát hiện một số mầm bệnh trên người như Pertussis
-Phát hiện một số mầm bệnh là vi rus, vi khuẩn trên vật nuôi, thủy hải sản (như: virus đốm trắng WSSV từ tôm,….
Các hệ thống phát hiện mầm bệnh trên đã được đưa vào thương mại hóa và được chứng nhận tiêu chuẩn chẩn đoán invitro, và tiêu chuẩn Châu Âu.