Kĩ thuật di truyền đây

[haupro]

[FONT=&quot]Giả sử bạn đã nhân dòng được một trình tự cADN của sinh vật nhân chuẩn và muốn biểu hiện gen này ở tế bào E. coli. Loại véctơ nào bạn cần sử dụng? Véctơ này phải cần có đặc điểm gì? Véctơ này cần có những cải tiến gì để biẻu hiện được protein trong tế bào động vật có vú?<o></o>[/FONT]

 

[Lucky_boy]

Mạo muội trả lời là plasmit cần có các đặc điểm:
-Plasmit có kích thước ngắn
-Có gen chuẩn (gen đánh dấu) bằng 2 gen kháng 2 loại kháng sinh khác nhau
-Có điểm cắt của enzim giới hạn restrictaza
-Có thể nhân lên trong tế bào nhận .
Véctơ này cần có những cải tiến gì để biẻu hiện được protein trong tế bào động vật có vú?
Câu này bạn giải thích giùm tớ với...
Mà bạn/anh/chị còn nhiều câu hỏi về KTDT nữa không ạ?Post lên cho mọi người xem với!<!-- / message -->

 

[Trương Hiền Hạnh]

[FONT=&quot]Giả sử bạn đã nhân dòng được một trình tự cADN của sinh vật nhân chuẩn và muốn biểu hiện gen này ở tế bào E. coli. Loại véctơ nào bạn cần sử dụng? Véctơ này phải cần có đặc điểm gì? Véctơ này cần có những cải tiến gì để biẻu hiện được protein trong tế bào động vật có vú?<o></o>[/FONT]

Theo như em được biết thì nếu gen ở sinh vật nhân chuẩn thứ nhất khi biểu hiện thì nên ưu tiên đối với chính sinh vật đó. Nếu không có sinh vật đó thì có thể dùng các loại nhân chuẩn đã được thương mại hóa ví dụ như nấm men chẳng hạn.

Với câu hỏi của anh/chị là biểu hiện ở E.coli thì nên lựa chọn vectơ chuyển gen là plasmid vì nó có kích thước nhỏ ~> phù hợp với E.coli. Đối với plasmid thì phải là plasmid thương mại và có các đặc điểm chính sau:
- Có phần ori tự nhân chính bản thân nó sau khi đưa vào cơ thể
- Có phần để enzyme giới hạn có thể tác dụng nhằm chèn gen cần biểu hiện vào (phần này còn gọi là phần chứa các điểm cắt giới hạn).
- Có gen kháng kháng sinh hay còn gọi là phần nhận biết để phân biệt giữa plasmid có chứa gen và không chứa gen.
Ba yếu tố nói trên là dành cho việc chuyển gen nói chung hay còn gọi là biến nạp. Còn nếu để biểu hiện nữa thì phải có thêm phần promoter, initiator, terminator và điểm bám cho ribosome nhằm đảm bảo cho quá trình phiên mã và dịch mã diễn ra như bình thường.

 

[Nguyễn Hoàng Bảo Kim]

câu này nhìn thấy wen mà hông bít trả lời sao.
TRong mấy sách SHPT hay DTH nói nhìu lắm thì phải mà đọc rồi,đọc nữa,...đọc càng nhìu càng hông bít trả lời sao.
tốt hơn hết nên hiểu cho thật đơn giản,càng đơn giản càng tốt để khỏi mất công.
vectơ nào bạn cần sử dụng?cả phage và plasmid đều có ưu nhược điểm khác nhau,chẳng bit sao ai cũng chọn plasmid thế?
còn mấy câu sau thì chẳng bit thế nào nữa.

 

[Lucky_boy]

Cho em hỏi tại sao phage là thể truyền lí tưởng?

 

[mabu9669]

[FONT=&quot]Véctơ này cần có những cải tiến gì để biẻu hiện được protein trong tế bào động vật có vú?[/FONT]

Chắc cần biến đổi để đoạn cần mong muốn có thể trao đổi chéo với bộ gen của tb chủ. vì đa số tb có cơ chế thải loại, phân cắt DNA lạ.
Phage làm vecto à. Phage nó xâm nhiễm tb chủ rồi vô tình chuyển dùm 1 đoạn gen chứ nó có muốn vậy đâu. xác suất thành công cực thấp :mygod: