Chiều là 5'-3'. DNA pol luôn tổng hợp mạch mới theo chiều 5'-3' mặc cho chiều của hai mạch ADN là 3'- 5' hay 5'-3', ADN pol bám vào mạch 3'-5' nên mạch sớm được tổng hợp đầu tiên ở đầu 5' , nu tiếp tục lắp theo hướng 5'-3'. Còn mạch muộn (mạch tổng hợp bằng cách nối các đoạn Okazaki) cũng được tổng hợp theo chiều 5'-3' dựa trên mạch mẹ 5'-3' do đó mạch mẹ bị DNA pol làm uốn ngược theo hình vòng tròn, khi ấy mạch mẹ sẽ có chiều 3'- 5' nên mạch muộn phải tổng hợp theo từng vòng tròn (DNA pol đi đến đâu vòng tròn mới hình thành tới đó, vòng tròn cũ giải tán tới đó). Tóm lại, mạch DNA mới luôn tổng hợp theo chiều 5'-3'
Tới lượt RNA, mạch RNA mới được tổng hợp nhờ RNA pol. RNA pol là enzim phụ thuộc DNA pol. Nghĩa là chiều tổng hợp của RNA pol phụ thuộc chiều tổng hợp của DNA pol. Bởi vậy chiều tổng hợp của mạch RNA mới là 5'-3', dù cho mạch được chọn là mạch gốc để phiên mã là 3'-5' hay 5'-3' thì RNA pol cũng đều bám vào đầu 3' tiến hành phiên mã theo hướng 3'-5', rnu đầu tiên được hình thành ở đầu 5' các rnu tiếp theo lắp về phía 3', nói cách khác mạch RNA mới tổng hợp theo chiều 5'-3'.
Chiều của mạch thẳng mới quan trọng chiều của mạch không gian không quan trọng. Lý do liên quan tới biến tính và hồi tính, mạch thẳng quyết định mạch không gian, nên chiều mạch thẳng quyết định chiều mạch không gian. Do đó chiều của dạng mạch không gian như tRNA và rRNA vẫn là chiều 5'-3'. ?
Tương tự, nhân tố mở mạch polypeptit, nhân tố kéo dài mạch, và nhân tố kết thúc mạch polypeptid cũng phụ thuộc vào DNA pol. Ở những protein không có dạng mạch không gian thì chiều ?là 5'-3'. Mạch không gian như xoắn anpha và nếp gấp bêta và cấu trúc mạch không gian cao hơn như myosin và hemoglobin cũng bị biến tính hồi tính nên mạch thẳng quyết định mạch không gian nên chiều vẫn là 5'-3'.
Nói tóm lại, hai căn cứ quan trọng nhất để xác định chiều mạch thẳng và mạch không gian là DNA pol và hiện tượng biến tính hồi tính.
Thân.