Nguyên tắc của PCR

[hoanghontim99]

Mọi người em có cái này thắc mắc, mong mọi người giúp đỡ với ạ!
Vì sao trong phản ứng PCR, chỉ nhân đoạn DNA giữa 2 mồi mà ko nhân hết cả đoạn phía sau mồi ạ? Em đọc thấy enzyme DNA polymerrase nhận biết điểm kết thúc để ngừng sao mã nhưng em chẳng biết điểm kết thúc đó là j cả.
Cảm ơn mọi người nhiều lắm!

 

[orion8x]

Vì DNA pol chỉ tổng hợp đoạn DNA từ 3'=>5', mà kg có chiều ngược lại. Do đó PCR cần có 2 primer. F primer và R primer, mỗi cái extend 1 đầu nên chỉ có đoạn giữa 2 primer là đc nhân lên thôi.
HƠn nữa, kỹ thuật PCR chi nhân đoạn DNA target thôi, thường là 3k bp, max 20k nhưng rất khó.
Kg có đoạn code cho điểm dừng, hơi khó để hiểu khái niệm này ở vài vòng đầu nhưng độ dài cũng như điểm dừng của DNA đc qui định bởi 2 primer. Tốt nhất là lên youtube, search PCR animation, coi bằng hình ảnh dễ hiểu hơn là nghe giải thích.

 

[hoanghontim99]

Cảm ơn nhiều nhé! Đúng là xem cái video xong mới hiểu đc cặn kẽ vấn đề