Search results

Chào bạn. Theo tôi thì bạn hơi "cầu kỳ" khi làm thí nghiệm screening. Theo tôi biết thì Bgl2 không phải là enzyme phổ biến, vì thế chắc nó đắt tiền. Thông thường nếu trong insert không có các enzyme phổ biến như EcoRI, BamHI, SalI, SacI thì tôi sẽ dùng chính các enzyme đó digest, như vậy nó...

Nói chung tôi ít có vấn đề về cloning nên những thao tác đó là phòng ngừa thôi bạn ạ. Nếu bạn cho lượng insert với vector vào nhiều thì 2ul cũng đủ mà. Tôi dùng 200 ul competent cell. Có lẽ ligase của lab tôi khá tốt nên không có vấn đề gì về cloning. Về ligation và biến nạp thì nói chung bạn...

Thông thường tôi ligase ở 16 độ overnight (8 tiếng), với thể tích là 10 ul. Sau đó dùng khoảng 2-5 ul biến nạp và phần còn lại cất 4 độ. Nếu không ra thì làm tiếp phần còn lại. Nếu bạn cảm thấy số lượng colony ít thì bạn nên tăng thể tích trải, bằng cách ly tâm nhẹ để tủa tế bào transformant...

Số khuẩn lạc ít có thể là vấn đề. Bạn nên xem lại ligase và competent cell. Việc tách colony trắng không mang insert là chuyện thường gặp trong cloning. Không có lý giải rõ ràng nhưng trong trường hợp bạn có ít colony thì nên nhặt tất (cả trắng cả xanh) và kiểm tra. Với insert kha khá như thế...

ặc, mong nó accept để còn tốt nghiệp thôi hihi. không cần high IF

Đang mỏi mòn chờ tin ;)

http://en.wikipedia.org/wiki/Nude_mouse Hoặc có loại tế bào người nhưng không gây tác dụng thải loại: http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0045757

Người ta dùng nude mouse (chuột suy giảm miễn dịch) trong thí nghiệm đó thì sẽ không có hiện tượng thải loại miễn dịch bạn ạ.

Giải Nobel Y học năm nay đã được trao cho 2 nhà khoa học: + John Gurdon: cho những đột phá về chuyển nhân, mà kết quả nổi bật nhất là clone được cừu Dolly + Shinya Yamanaka: cho những đột phá về cơ chế phân tử của việc một tế bào soma bình thường trở thành tế bào gốc đa năng. Công trình của...

Bạn có thể làm như thế này: Nuôi như trên nhưng khoảng 1 ml Lấy 400 ul để làm minprep size check. Cái này khá là trực quan: insert của bạn nếu kích thước kha khá một chút (>0.3 kb) thì plasmid có insert sẽ trồi lên 1 chút so với plasmid không có insert (đối chứng). Trong mấy candidate mà bạn...

Trường hợp 2 insert ligase với nhau rồi ligase vào vector là cực kỳ thấp bạn ạ. Trường hợp của bạn thì nên làm lại phản ứng biến nạp, rồi screen colonies bằng onestep miniprep như tôi đã mô tả trong forum. Trước hết bạn screen vài chục colony bằng size. Sau đó nếu cắt thử 1 positive colony mà...

Bạn cfareast đọc lại cái post đầu tiên. Nếu bạn tra bảng và pha Tris buffer RT thì pH = 8 tại đó sẽ trở thành pH = 8.5 khi bạn dùng buffer đó để, ví dụ, tách protein, thẩm tích vì các thí nghiệm này đều được thực hiện ở đk 4 độ. Điều quan trọng đối với việc chi li khi làm thí nghiệm không phải...

Cám ơn bạn. Như vậy nói chung là vẫn còn ti tỉ thứ cần phải chấn chỉnh trong khi làm thí nghiệm. Ở lab mình thì Tris thường được pha ở RT và store ở RT luôn. Cái này khi đổ SDS-PAGE gel, Western thì không sao. Nhưng khi mình tách protein dùng Tris buffer thì vẫn hay dùng luôn Tris buffer RT. Mà...

Mình muốn hỏi các bạn làm SHPT về truyền thống pha buffer trong lab của các bạn. Như ta biết pH của buffer phụ thuộc vào nhiệt độ. Thông thường trong shpt thì ta thường làm việc ở nhiệt độ 4oC. Tuy nhiên khi pha các đệm để sử dụng (ví dụ phosphate buffer, Tris buffer) thì ta lại pha ở 25oC. Khi...

By the way, X quen ai lam nganh nghien cuu lam sang gioi thieu cho minh nhe. Tieng anh goi la CRO = Contract Research Organization, cac cty MNC dang hoat dong o Vietnam la Quintiles & Paraxel, Email: Giang Lam glam@emavn.com

Thank you for your past assistance in publicizing our vacancy. We are recruiting again and hope for your kind co-operation again in circulating the current vacancy to your Master of Biotechnology grads who may be interested in working overseas and being exposed to the cutting-edge...

Nhờ các bạn lấy hộ bài này: http://www.nature.com/nri/journal/v12/n8/full/nri3251.html mình cám ơn trước.

In 30 papers published simultaneously, the five-year ENCODE project reports the mapping of more than four million regulatory sites across the human genome. In an effort that rivals the original human genome project in scale and scope, researchers from around the world have been...

Còn tùy mục đích biến nạp. Ví dụ subcloning, hoặc làm library thì nói chung yêu cầu về efficiency phải cao hơn là kiểu clone TA. Hoặc với những trường hợp insert lớn thì yếu tố efficiency cũng quan trọng. Nếu mọi hóa chất đều chuẩn, giống chuẩn thì việc làm đều tay là bình thường ;)

Cám ơn bạn Thọ :)