Em đang cần bản full của bài báo dưới. Anh chị nào lấy hộ giúp em được không. Em cám ơn!
"An in-house method for the detection and quantification of HCV in serum samples using a TaqMan assay real time PCR approach" (2008)
Bashiardes S, Richter J, Christodoulou CG.
Đầu tiên các đoạn DNA với kích thước 1.5kb được cắt ra bằng DNase I một cách ngẫu nhiên thành các đoạn có kích thước nhỏ sau đó đem điện di trên gel agarose và chỉ thu lại các đoạn có kích thước nhỏ khoảng 10-50bp ( tốt nhất là các đoạn 10-25bp) để thực hiện tiếp phản ứng PCR.Đây là quá trình...
Cách này mình đã thử trước đó rồi nhưng có vấn đề vì agarose cũng bị tủa theo và tạo thành một khối màu trắng lớn. Trong mấy cái kit nó không đề cập đến vấn đề này luôn nên thử rồi mới biết.
Cảm ơn các bạn trả lời câu hỏi giùm mình. Sản phẩm thu về mình sẽ sử dụng tiếp làm PCR nhưng vì hiệu quả thu những đoạn kích thước nhỏ quá thấp nên khi lượng DNA đầu vào phải sử dụng nhiều nên rất tốn mẫu. Mình sẽ cân nhắc để làm tiếp.
Nhưng DNA phải tách ra từ gel agarose 5% thì làm cách nào mà dùng được cách này?
Mình có biết một loại giấy được đặt vào agarose sau đó mà thu DNA kích thước nhỏ này bằng cách điện di nhưng chỉ sử dụng cho 1 thí nghiệm nhỏ đặt mua cũng tốn kém mà chưa chắc ở VN đã có bán nên muốn tìm ra 1 cách...
Có bác nào biết kit hoặc cách để tinh chế đoạn DNA có kích thước 10-50bp từ gel agarose không? Em cắt DNA bằng DNase I sau đó thu được một dải kích thước khác nhau và chỉ cần đoạn kích thước nhỏ thôi nhưng thu bằng các kit tinh chế DNA thông thường thì DNA nhỏ bị trôi đi hết.
Mình cũng đang tìm hiểu về Real-time PCR nên cũng có một số thông tin cho bạn sau.
1. Nhược điểm của SYBR green I:
- Tín hiệu huỳnh quang phát ra không cao và có thê ức chế PCR.
- Không sử dụng được cho multiplex pcr hoặc PCR phát hiện SNP
2. Cơ chế
Chất phát huỳnh quang chèn vào sợi đôi DNA...
Không biết bạn đã lên thớt chưa nhưng hy vọng câu trả lời này có thể giúp bạn.
Đây là 3 trường hợp có thể xảy ra khi thiết kế primer mà mình đã viết trước bây giờ ngại dịch ra chắc bạn đọc cũng có thể hiểu được.
Cloning a gene encoding A protein of the virus
The first, we find sequence of...
:thanks: vì đã trả lời cho vấn để của mình.
Theo cách các bạn giải thích thì nguồn DNA bị nhiễm ở đây chỉ là các sản phẩm PCR cũ được khuếch đại với T thay bằng U đúng không? Còn các DNA khác có nu T mà không phải là U từ phòng thí nghiệm thì không thể loại bỏ bằng cách này nhưng đối với phòng...
Nếu xử lý DNA khuôn trước với UNG và dUTP thì liệu DNA của mình có bị tổng hợp sau đó tạo các điểm nick giống như các DNA ngoại lai không? và tại sao khi xử lý như thế này thì DNA mình quan tâm lại không bị ảnh hưởng mà chỉ có các DNA ngoại lai thôi? :please::please::please::please::please:
Mình đang tìm hiểu về vai trò của UNG và dUTP để chống ngoại nhiễm thì gặp một vấn đề là không hiểu là nếu khuôn cũng được cho vào từ lúc ban đầu thì nó cũng sẽ nhân lên giống như DNA ngoại nhiễm vào có sự thay thể T thành U và sẽ bị phá hủy bằng UNG ( uracil - N- glycosyl)?
Còn nếu cho DNA...
Theo mình thì sử dụng 2 enzyme ở 2 hãng khác nhau không có vấn đề gì nhưng sẽ làm giảm hiệu suất thu hồi DNA vì phải qua hai bước tinh sạch và vấn đề để DNA ở ngoài nhiệt độ 37oC qua đêm những 2 ngày có thể DNA của bạn bị nhiễm các yếu tố khác từ Lab. Vậy tốt nhất thì nên sử dụng enzyme cùng 1...
Mình đang làm tiểu luận vacxin nhưng mắc 1 số từ chuyên ngành không dịch được mong mọi người gúp đỡ :
Conventional Vaccinnology Approach
For these reasons, with the important exception of diphtheria and tetanus toxoids,which even today are manufactured with an 80-year-old technology, subunit...
Bác nào cho em hỏi nếu thực hiện phản ứng PCR với ADN hệ gen và cặp mồi đặc hiệu của 1 gen có mặt trong hệ gen lại thu được 2 băng , 1 băng đúng kích thước với đoạn ADN nằm giữa 2 mồi . Vậy băng thứ 2 là gì và loại bỏ bằng cách nào ?
Cấu trúc không gian của intron trên mARN đóng vai trò quan trọng đảm bảo sự nối exon chính xác tạo cấu trúc không gian mARN .
( Intron tự cắt nối bằng cách xoắn xuýt vào nhau rồi đứt ra mà không cần protein hay cofactor nào )
Gia đình gen ( gen trong họ gen ) : những gen có trình tự tương đồng mã chung cho 1 sản phẩm nhưng thường hoạt động ở các cơ quan tổ chức biệt hóa khác nhau .VD: gen mã cho globin :up::up::up:
:???::???:Cách phân lập . Ban phải chuẩn bị môi trường ( là gạo đã nấu chín , để nguội ) sau đó đặt ra không khí tới ngày hôm sau thu lại và tiến hành phân lập các vi sinh vật thu các chủng Aspergillus ,Endomycopsis , nấm men Saccharomyces cerevisiae.
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.