Recent content by Lê Hồng Đức

  1. L

    Làm tan lại những protein bị biểu hiện ở inclusion bodies

    Chào Khôn, bước số 7 làm tan inclusion body của em rồi, bước số 8 nhằm loại bỏ những phần không tan được, chứ không phải tủa lại protein của em đâu, em đọc kỹ lại xem. Sau bước số 8, họ có bảo đổ supernatant đi đâu, họ bảo đổ vào 1 tuýp sạch khác cơ mà, còn cục cặn thì mới vứt đi.
  2. L

    Nguyên lý tạo vắc xin

    Đúng là có rất nhiều nguyên nhân để một vài liều/mẻ vaccine lọt lưới, nhưng mình nghĩ vấn đề này nằm ngoài chủ đề và sẽ không bàn luận gì thêm.
  3. L

    Vấn đề ly tâm, buffer trong các thí nghiệm SHPT

    100 mM Tris-HCl pH 7.5 chính xác thì không thể làm vỡ tế bào vi khuẩn của bạn ngay sau khi hòa cặn được. Khi pha đệm Tris, bạn sẽ có pH rất cao (khoảng 10) nên phải dùng HCl để chỉnh pH xuống (tuy nhiều công ty bán sẵn Tris-HCl, trong trường hợp đó bạn không phải chỉnh pH nhiều lắm). Mình muốn...
  4. L

    Vấn đề ly tâm, buffer trong các thí nghiệm SHPT

    Ngay cả Hiếu tăng vòng li tâm cũng không để làm gì khi phần lớn (nếu không phải tất cả) tế bào vi khuẩn đã vỡ. Protein giải phóng hết ra ngoài rồi còn đâu. Vả lại, DNA (NST) của vi khuẩn một khi được giải phóng sẽ to hơn vi khuẩn rất nhiều lần và thừa sức chiếm chỗ hết cái 1 ml "đệm Tris" của...
  5. L

    Vấn đề ly tâm, buffer trong các thí nghiệm SHPT

    Vậy thì ngay sau khi bạn cho buffer vào, các tế bào của bạn đã bị vỡ rồi. Dịch nhầy quánh đó là do nhiễm sắc thể của vi khuẩn được giải phóng đó. Mình cũng đã nghi ngờ điều này nên mình hỏi bạn pha đệm rửa như thế nào. Bạn không làm gì được thêm khi vi khuẩn đã vỡ đâu. Bạn phải pha lại đệm khác...
  6. L

    Nguyên lý tạo vắc xin

    Mình cũng từng nghĩ với hàng xấp nội quy và thường quy, không có gì qua mặt được TTKĐQG, vậy mà vẫn qua đó Minh ạ. Bạn cứ ở lâu mới biết trong chăn có rận. Mình không nói riêng gì VN mà trên thế giới cũng thế thôi. Tuy vậy, mình không bảo tất cả các loạt vaccine đều như thế (thế thì chết cả nút...
  7. L

    Kháng thể

    Mình không nghĩ đó là do tính đặc hiệu của kháng thể. Đúng là một số loại vaccine chỉ cần tiêm một đợt, một số loại khác cần nhắc lại nhiều lần, đó là do vaccine có "tốt" hay không. IgG chỉ tồn tại được trong máu tối đa là 2 tháng dù vaccine có tốt đến mấy. Sự tồn tại kéo dài của kháng thể đặc...
  8. L

    Vấn đề ly tâm, buffer trong các thí nghiệm SHPT

    1. Xin bạn mô tả kĩ hơn, sau khi li tâm không tạo phase lấy lại supernatant được là thế nào? Tế bào không lắng cặn được à? Bạn thấy sau khi hòa tan cặn tế bào (sau khi gặt khỏi môi trường nuôi cấy) bằng đệm 100mM Tris-HCl pH7.5, bạn có một dịch nhày à? Mong câu trả lời chi tiết từng bước của...
  9. L

    Vấn đề ly tâm, buffer trong các thí nghiệm SHPT

    Protoplast mà li tâm vậy chắc chắn vỡ hết. Tế bào này không có thành (cell wall), giống như các tế bào động vật khác (nếu bạn nào làm nuôi cấy tế bào rồi chắc biết), chỉ chịu được lực li tâm khoảng 1000-3000 vòng/phút là cùng. Nên cho EDTA vào cả đệm rửa vi khuẩn nữa!
  10. L

    Kết quả PCR phập phù và thấp

    Đúng là mình đánh nhầm 2 phát đầu tiên Taq thành Tag, cảm ơn các bạn đã chỉ ra và vô cùng xin lỗi các bạn đã tốn thời gian thảo luận. Không hiểu sao mình không thể sửa được, có mod nào sửa hộ mình cái. Cám ơn nhiều nhiều. @ Trung: Đồng ý là 8000 vòng/phút trong 5 phút đủ để lắng cặn hầu hết các...
  11. L

    Kháng thể

    Như mình đề cập ở trên, IgA1 cũng như các Ig khác, lưu hành nội bộ trong máu, chủ yếu ở dạng đơn phân. IgA2 được sản xuất để xuất khẩu trong dịch tiết, thường ở dạng dimer, và được bảo vệ bởi bổ thể ngoại tiết do các tế bào ngoại tiết cung cấp (không phải tế bào B nơi sinh ra IgA2 nói riêng và...
  12. L

    Nguyên lý tạo vắc xin

    Xin hai bạn bình tĩnh, Trung đừng chụp mũ tất cả như vậy, dân QC có thể họ không biết nhiều nhưng cái gì họ biết thì biết chắc lắm, họ bảo an toàn là an toàn đấy. Mở ngoặc, nhưng theo mình biết, nếu vaccine không đạt chỉ số an toàn, mỗi mẻ đổ đi mất hàng trăm triệu đồng, nên việc "vớt vát" một...
  13. L

    Tá chất cho vaccine

    Ngoài những tá chất cho vaccine trên mà bạn Minh đã đề cập (khá đầy đủ), mình xin bổ sung thêm các chất tương tác với thụ thể (receptor-based agonist). Thụ thể được nghiên cứu nhiều là các thụ thể giống Toll (Toll-like receptor [TLR]) và trong số đó, CpG oligonucleotide, chất tương tác với...
  14. L

    Kết quả PCR phập phù và thấp

    Taq (từ Thermus aquaticus) có đặc tính chạy nhanh và không khó tính, nếu hỗn hợp phản ứng có thừa cái này thiếu cái kia chút đỉnh vẫn chạy tốt. Có điều Taq hay mắc lỗi (1 đột biến trên 1-2 kb) nên không thích hợp cho tạo dòng hoặc chạy tìm trình tự. Taq dùng tốt trong chẩn đoán. Pfu (từ...
  15. L

    Kháng thể

    Câu hỏi rất hay. IgA chiếm khoảng 15-20% Ig tổng số trong máu (như trên), chủ yếu ở dạng đơn [monomer]. IgA1 giống các Ig khác và được tạo bởi tế bào B trong máu, trong khi đó IgA2 được tạo bởi tế bào B niêm mạc và thường được tiết theo các dịch tiết như nước mắt, sữa, nước bọt hay dịch tiết...
Back
Top