Chào mọi người.
Em có một thắc mắc về cách chọn lọc dòng vector biểu hiện. Theo em hiểu:
- Để nhận biết xem vector có được biến nạp hay không thì mình đưa vào vector gen kháng kháng sinh hay gen bổ trợ di truyền như gen lacZ rồi chọn lọc trên môi trường.
- Còn để nhận biết xem gen mục tiêu có được đưa vào vector hay không thì mình dùng phương pháp lai với mẫu dò, miễn dịch, hay nếu gen mã hoá cho enzyme thì mình có thể xem hoạt tính của nó...
Em muốn hỏi là có những cách nào khác để nhận biết vector đã biến nap hay gen mục tiêu đã chèn vào hay không?
Thứ hai là gen biểu hiện cần có promoter, terminator, gen mục tiêu và vùng gắn ribosome, vậy thì có bắt buộc là các vùng này phải liên tiếp nhau không hay từ promoter có thể qua một đoạn gen nào đó mới đến gen mục tiêu? Nếu dc thì sau này mình có cần cắt bỏ những đoạn thừa không và như thế nào?
Cuối cùng là sử dụng sự bất hoàn chèn vào 1 gen nào đấy như gen kháng kháng sinh chẳng hạn dùng trong những trường hợp nào và có dùng trong việc chọn lọc vector biểu hiện không?
Em cám ơn
Em có một thắc mắc về cách chọn lọc dòng vector biểu hiện. Theo em hiểu:
- Để nhận biết xem vector có được biến nạp hay không thì mình đưa vào vector gen kháng kháng sinh hay gen bổ trợ di truyền như gen lacZ rồi chọn lọc trên môi trường.
- Còn để nhận biết xem gen mục tiêu có được đưa vào vector hay không thì mình dùng phương pháp lai với mẫu dò, miễn dịch, hay nếu gen mã hoá cho enzyme thì mình có thể xem hoạt tính của nó...
Em muốn hỏi là có những cách nào khác để nhận biết vector đã biến nap hay gen mục tiêu đã chèn vào hay không?
Thứ hai là gen biểu hiện cần có promoter, terminator, gen mục tiêu và vùng gắn ribosome, vậy thì có bắt buộc là các vùng này phải liên tiếp nhau không hay từ promoter có thể qua một đoạn gen nào đó mới đến gen mục tiêu? Nếu dc thì sau này mình có cần cắt bỏ những đoạn thừa không và như thế nào?
Cuối cùng là sử dụng sự bất hoàn chèn vào 1 gen nào đấy như gen kháng kháng sinh chẳng hạn dùng trong những trường hợp nào và có dùng trong việc chọn lọc vector biểu hiện không?
Em cám ơn
