Em đang có chút thắc mắc về pha mồi PCR mong các cao nhân chỉ giáo giúp e với ạ
Chuyện là e muốn giảm nồng độ mồi từ 100pmol xuống 10pmol, và trộn chung 2 mồi với nhau nhưng lại đang băn khoăn giữa hai cách pha:
+ cách 1: em pha riêng từng mồi sau đó trộn chung chúng lại với nhau
Ví du: mồi xuôi: 1ul mồi stock + 9ul nước
mồi ngược: 1ul mồi stock + 9ul nước
=> sau đó e trộn 2 ống này với nhau sẽ được một thể tích là 20ul mồi (gồm cả mồi xuôi+ngược có nồng độ 10pmol)
+ cách 2: e tính toán tổng thể tích mồi cần pha sau đó lấy mỗi mồi stock 1 lượng bằng 1/10 so với tổng thể tích cần pha.
Ví dụ: e muốn pha 20ul mồi, e sẽ bổ sung 2ul mồi xuôi, 2ul mồi ngược và 16ul nước.
E thì đang nghiêng về cách pha thứ 2 hơn.
Chuyện là e muốn giảm nồng độ mồi từ 100pmol xuống 10pmol, và trộn chung 2 mồi với nhau nhưng lại đang băn khoăn giữa hai cách pha:
+ cách 1: em pha riêng từng mồi sau đó trộn chung chúng lại với nhau
Ví du: mồi xuôi: 1ul mồi stock + 9ul nước
mồi ngược: 1ul mồi stock + 9ul nước
=> sau đó e trộn 2 ống này với nhau sẽ được một thể tích là 20ul mồi (gồm cả mồi xuôi+ngược có nồng độ 10pmol)
+ cách 2: e tính toán tổng thể tích mồi cần pha sau đó lấy mỗi mồi stock 1 lượng bằng 1/10 so với tổng thể tích cần pha.
Ví dụ: e muốn pha 20ul mồi, e sẽ bổ sung 2ul mồi xuôi, 2ul mồi ngược và 16ul nước.
E thì đang nghiêng về cách pha thứ 2 hơn.
