Hôm trước em có mấy buổi lab thực hiện các thí nghiệm về cây chuyển gene. nhưng em đang hoàn toàn mù tịt mục đích của 2 bước GFP và Southern Hybridization. Các thí nghiệm được thực hiện như sau:
1/ Chuyển gene vào 1 mô cây đc nuôi cấy in vitro = biolistic gun
2/ Kiểm tra GFP
3/ Tách chiết genomic DNA từ mô cây đó
4/ PCR
5/ Southern hybridization
Theo em được biết là các bước này liên quan tới nhau hết.
GFP (reporter gene:Green Fluorescent Protein) dùng để xác định cây đã được chuyển gene hay chưa. Còn Southern Hybridization dùng để xác định 1 đoạn DNA đặc biệt trong 1 DNA lớn (và DNA đc dùng cho phương pháp này là genomic DNA đã tách chiết). Hiểu được mục đích chung chung 2 phương pháp nhưng em không nắm được chi tiết cụ thể là Southern H. để làm gì trong bài lab đó???
Nếu Southern để xác định trong DNA tách chiết đó có đoạn gene đã chuyển hay không, thì GFP cũng đã được dùng để xác định trước đó rồi????
Ai giải thích giúp em các kỹ thuật này với!! Xin cảm ơn!!
1/ Chuyển gene vào 1 mô cây đc nuôi cấy in vitro = biolistic gun
2/ Kiểm tra GFP
3/ Tách chiết genomic DNA từ mô cây đó
4/ PCR
5/ Southern hybridization
Theo em được biết là các bước này liên quan tới nhau hết.
GFP (reporter gene:Green Fluorescent Protein) dùng để xác định cây đã được chuyển gene hay chưa. Còn Southern Hybridization dùng để xác định 1 đoạn DNA đặc biệt trong 1 DNA lớn (và DNA đc dùng cho phương pháp này là genomic DNA đã tách chiết). Hiểu được mục đích chung chung 2 phương pháp nhưng em không nắm được chi tiết cụ thể là Southern H. để làm gì trong bài lab đó???
Nếu Southern để xác định trong DNA tách chiết đó có đoạn gene đã chuyển hay không, thì GFP cũng đã được dùng để xác định trước đó rồi????
Ai giải thích giúp em các kỹ thuật này với!! Xin cảm ơn!!