anhtrungbio
Senior Member
Thân gửi các anh chị em,
Trong quá trình làm thí nghiệm cloning, em hay phải dùng nhiều loại enzyme giới hạn khác nhau. Trong đó có 1 số loại như BamH1, Bgl2... theo như NEB thì chúng No heat inactivation. Do đó, trước khi ligation em cứ phải purify trên gel rất mất việc mà có khi làm hỏng mất DNA.
Vậy, các bác cho em hỏi có phải các loại này không thể dùng nhiệt làm "đơ" chúng nó phải ko ạ??? Có cách nào làm bất hoạt chúng mà ko cần phải purify không?
VD như Bgl2, trên NEB nói rằng nó có thể extended digestion, nhưng < 8 hours => Ta có thể cho nó digest hơn 8h là có thể yên tâm ko cần purify có phải ko ạ?
Rất mong mọi người cho ý kiến!!!
Trong quá trình làm thí nghiệm cloning, em hay phải dùng nhiều loại enzyme giới hạn khác nhau. Trong đó có 1 số loại như BamH1, Bgl2... theo như NEB thì chúng No heat inactivation. Do đó, trước khi ligation em cứ phải purify trên gel rất mất việc mà có khi làm hỏng mất DNA.
Vậy, các bác cho em hỏi có phải các loại này không thể dùng nhiệt làm "đơ" chúng nó phải ko ạ??? Có cách nào làm bất hoạt chúng mà ko cần phải purify không?
VD như Bgl2, trên NEB nói rằng nó có thể extended digestion, nhưng < 8 hours => Ta có thể cho nó digest hơn 8h là có thể yên tâm ko cần purify có phải ko ạ?
Rất mong mọi người cho ý kiến!!!
