Chào các anh chị,
Gần đây em gặp một khó khăn lớn về việc tinh sạch protein. Sau khi elute, protein của em bị đóng vón (aggregation) rất nhanh. Không biết có anh chị nào đã từng bị trường hợp này chưa xin chỉ giáo em với.
Về error prone PCR thì trước đó đã có một anh trong lab làm rồi, nhưng anh đã không thể tạo ra một thư viện đột biến ? ?tốt nên đã thất bại. Em mới nhận cái đề tài này, GS bảo là ổng không thích dùng error prone PCR vì ông nghĩ nó đôi lúc cho kết quả không tốt. Ông GS muốn em nghĩ ra hướng tạo...
Chào các anh chị,
Em muốn hỏi về Saturation mutagenesis. em muốn làm tăng ái lực của một protein với ligand của nó bằng cách tạo các đột biến ngẫu nhiên. Protein của em có 2 vùng bám chủ yếu với ligand nên Em muốn tạo đột biến ngẫu nhiên trên 2 vùng đó.
Em đang suy nghĩ về việc thiết kế primer...
Nhờ các anh chị lấy giùm em 2 bài báo này:
Link: http://biomed.humanapress.com/index.php?option=com_opbookdetails&task=chapterdetails&chapter_code=1-59259-395-X:75&category=biomedprotocols...
Hi chị Thùy,
Em chỉ lấy được bài thứ 3 thôi, những bài còn lại phải nhờ các anh chị cao tay hơn lấy.
Molecular dynamic studies of the compatibility of some cellulose derivatives with selected ionic liquids
Molecular Simulation, Volume 32, Number 2, February 2006, pp. 109-115(7)
Em mới đọc được một bài giảng của GS trong môn học Industrial biotechnology. Trong đó có đề cập đến: nếu như protein của mình biểu hiện ở dạng inclusion body, thì một trong những cách khắc phục (ngoài việc giảm nhiệt độ nuôi cấy, thay đổi pH...) là sử dụng môi trường giàu dinh dưỡng ( Vì dụ như...
Chào mọi người,
Em có một thắc mắc nho nhỏ là resin sau khi được dùng để tinh sạch protein ở điều kiện biến tính (8M urea) thì có bị ảnh hưởng gì không? Sau khi tinh sạch ở điều kiện biến tính xong, em có thể sử dụng lại resin này để tinh sạch protein ở điều kiện tự nhiên ko và nó có ảnh hưởng...
Anh Tiến,
Tại sao khâu phá vỡ tế bào của anh lại rắc rối vậy?Để phá vỡ tế bào,em chỉ để mẫu trong nước đá và sonicate thôi. Em nghĩ, khi làm việc với protein ở dạng soluble thì cái quan trọng là phải luôn giữ lạnh mẫu.
Em đang dùng chủng Ecoli BL21-DE3 và vector pET
Nhờ mọi người lấy giùm K bài này:
Instability, stabilization, and formulation of liquid protein pharmaceuticals
Wei WangCorresponding Author Contact Information, E-mail The Corresponding Author
Biotechnology, Bayer Corporation, 800 Dwight Way, Berkeley, CA 94701, USA
Received 21 January 1999...
Các anh chị giúp em lấy cuốn này:
http://www3.interscience.wiley.com/cgi-bin/bookhome/109875186?CRETRY=1&SRETRY=0
Published Online: 07 Jan 2005
Editor(s): Dr. Oliver Kayser, Prof. Dr. Rainer H. Müller
Print ISBN: 3527305548 ? ?Online ISBN: 3527602410
Print ISBN-13: 9783527305544 ? ?Online...
Các anh chị ơi,
Em đã thử thêm vào binding buffer và washing buffer 20% ?Ethanol, 20% Glycerol, dùng tới 1M NaCl và thử giảm pH xuống còn 6.5 nhưng vẫn bị nhiễm protein tạp.Bó tay luôn. Anh chị còn biết cách nào khác hoặc chất nào khác có thể làm giảm tạp protein không?À, em có thử dùng 1% SDS...
Anh Đức ơi, em làm theo protocol như sau:
Resuspend the cell pellet from 2 litres of culture in 30ml 1x PBS and sonicate on
ice to lyse the cells.
2. Pellet crude inclusion bodies at 12000g for 30 minutes and discard the
supernatant.
3. Resuspend the pellet in ~30ml Triton wash solution (0.5%...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.