Nhiều khả năng là phản ứng gắn mồi không phải là phản ứng thuận nghịch, chỉ xảy ra theo chiều kết hợp mà không có chiều phân ly. Mình có lý giải thêm một chút ở comment này. Tại nhiệt độ gắn mồi, hai sợi bổ sung của sản phẩm PCR cũng tái gắn với hằng số cân bằng rất cao nên có lẽ cũng nên coi là...
PCR được tiến hành theo nhiều chu kỳ (thường khoảng 30 chu kỳ). Mỗi chu kỳ bắt đầu bằng giai đoạn biến tính (vd: 95°C x 20s), tiếp theo là giai đoạn gắn mồi (vd: 55°C), cuối cùng là giai đoạn kéo dài (vd: 72°C).
Trước khi bắt đầu một chu kỳ PCR, trong phản ứng sẽ có sản phẩm PCR là AA' (nồng độ...
Tôi thấy thắc mắc này của anh Thành rất hợp lý:
Một khi PA' được tạo thành thì enzym (nếu còn hoạt tính) sẽ kéo dài đoạn mồi P, dẫn tới biến đổi phức hợp PA' và cuối cùng sẽ biến đổi PA' thành AA'. Hơn nữa, bình thường nhiệt độ gắn mồi thường thấp hơn Tm của mồi khoảng 5-10°C, nên ở nhiệt độ...
Nếu so sánh với trường hợp chưa bão hòa giả định như ở trên thì lúc bão hòa có nồng độ sản phẩm PCR gấp đôi, điều này có nghĩa là xác suất để các sợi đơn của sản pham PCR re-anneal lại với nhau tăng gấp 4 lần. Trong khi đó, nồng độ primer giảm 8.4/6.8 lần so với lúc chưa bão hòa nên xác xuất...
Lời khuyên này trái ngược với kết quả nghiên cứu thì phải? Nếu đúng theo kết quả nghiên cứu thì nên để các bà mẹ phải lo lắng nhiều hơn chứ nhỉ, sao lại "không có gì phải lo lắng"...
Từ đây có thể thấy: khi đến giai đoạn bão hòa thì số phân tử primer được sử dụng chỉ là 3.2 pmol, chiếm 30% tổng số primer có trong phản ứng. Nói cách khác, số lượng primer còn dư chiếm 70% khi phản ứng ở giai đoạn bão hòa. Như vậy tỉ lệ primer/template giảm chủ yếu là do nồng độ của template...
Vậy theo anh Hưng, nếu không có ADN ngoại lai trong phản ứng PCR, mà chỉ có template tăng lên thôi thì phản ứng PCR có chuyển từ giai đoạn hàm mũ sang giai đoạn bão hòa không, và bằng cách nào?
Mình không biết như thế nào thì được coi là đủ chậm. Trong mỗi chu kỳ của phản ứng PCR thì thông thường các sợi kép được biến tính (tách thành các sợi đơn) ở 95 độ trong khoảng 30s, sau đó nhiệt độ giảm xuống khoảng 50-60 độ để các sợi bổ sung bắt cặp với nhau tạo thành các sợi kép. Thời gian để...
Sau khi thay số và nhập vào Mathematica hệ phương trình trên:
Solve[10^20*(10^-18 - x)*(10^-18 - x - y) == x &&
10^6 (10^-6 - y)*(10^-18 - x - y) == y && x > 0 && y > 0, {x, y}];
N[%]
Nghiệm của hệ mà chương trình đưa ra là:
{{x -> 1.*10^-18 + 7.42188*10^-34 I,
y -> 2.*10^-6 -...
Cảm ơn Thảo đã cho ý kiến, chắc hệ phương trình hôm trước cũng tương đương với đáp án này. Vì mình quan tâm tới nồng độ của chất AA' và PA' nên chỉ thay đổi cách đặt ẩn một chút như sau:
gọi x là nồng độ (M) của AA', y là nồng độ (M) của PA' tạo thành sau phản ứng. Vậy nồng độ chất A là (a-x)...
Trong đoạn trích dẫn ở trên, tôi đồng ý với tác giả là khi sản phẩm PCR tăng lên thì số phân tử các sợi đơn của sản phẩm PCR tự gắn lại với nhau sẽ tăng lên. Tuy nhiên, từ kết luận này không thể đương nhiên suy ra: số phân tử sản phẩm PCR được gắn mồi sẽ giảm đi. Điều này có nghĩa là không kết...
Tóm tắt lại hai ý ở trên:
- Nếu coi sản phẩm PCR của một chu kỳ là cơ chất của enzym DNA polymerase ở chu kỳ kế tiếp, thì sự bão hòa enzym chỉ có thể giải thích được sự thay đổi từ giai đoạn tăng theo hàm mũ sang giai đoạn tăng tuyến tính, nhưng không giải thích được sự thay đổi từ giai đoạn...
Cảm ơn anh Lương đã gợi ý hướng giải quyết.
Hai phương trình là bởi vì trong dung dịch ban đầu có đồng thời ba chất A, A' và P anh ạ. Nếu như vậy hướng giải quyết sẽ thế nào ạ?
Em cũng lăn tăn ở chỗ nếu thay nồng độ bằng lượng chất thì giá trị của hằng số cân bằng sẽ thay đổi: K = [AA']/[A][A'].
Mình có bài này, nhờ các bạn gợi ý hướng để giải quyết giúp:
Cho hai phản ứng thuận nghịch sau:
1. A + A' = AA', có hằng số cân bằng ở nhiệt độ T là K'
2. P + A' = PA', có hằng số cân bằng ở nhiệt độ T là K
Nếu biết nồng độ ban đầu của A, A', P trong một dung dịch lần lượt là a, b, c.
Tính nồng...
Em có thể hiểu đoạn trên như sau không ạ: Tốc độ phản ứng đạt cực đại trong giai đoạn bão hòa của phản ứng PCR --> lượng sản phẩm PCR mới tạo thành trong mỗi chu kỳ ở giai đoạn này đạt cực đại. Điều này lại mâu thuẫn và không giải thích được cái giai đoạn "plateau" - "bình nguyên" của phản ứng PCR.
Em thử search nhưng chưa được, em vẫn muốn biết cơ chế của nguyên tắc đó. Anh Lương chỉ giùm em cái đường link với ạ.
Anh Lương bỏ qua, cho em hỏi PC là viết tắt của chữ gì đấy ạ?
Anh Lương cho em hỏi là khi thực hiện như phần in đậm thì sau khi làm lạnh trong đá hai phút ADN tồn tại ở dạng sợi đơn hay sợi kép, nếu cả hai thì chủ yếu là thành phần nào? Câu hỏi tương tự đối với lúc lai ở 65 độ?:thanks:
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.