Kính chào các bác
Em đang làm thí nghiệm tạo vector tái tổ hợp dùng plasmid pGEMT easy để clone 2 đoạn gen dài 2.5 và 3.4kb. Đồng thời dùng pBluescript SK+ để clone 1 đoạn khác dài 3kb. Cả 3 vector đều biến nạp vào E.coli DH5 alpha.
Cả 3 thí nghiệm đều dùng Blue/white screening trên môi...
Tớ không dùng protocol này.
Trong protocol tớ dùng có sử dụng đệm STET (Saccarose, Triton X-100, EDTA, Tris-HCl); lysozyme để phá huỷ thành tế bào. Sau đó tủa plasmid bằng isopropanol và rửa bằng EtOH
Lần nào mình tách cũng đc lượng plasmid khá lớn, mình thấy cách này rất hiệu quả (từ E.coli DH5...
Về luật thì bạn và cô ấy hoàn toàn có thể thành vợ chồng, vì đã quá 3 đời. Nên nhớ là nếu xét về góc độ sinh học thì nội ngoại có vai trò ngang nhau, thậm chí bên ngoại có phần nhỉnh hơn đấy bạn nhé!
Tuy nhiên, theo quan điểm cá nhân thì tôi vẫn thích lấy vợ càng xa quê càng tốt, và thực tế đã...
Ôi được rồi các bác ạ => 1 băng thật là sắc nét ^^ Em vui quá! :mrgreen::mrgreen::mrgreen: Mất 4 lần PCR oan uổng.
Hoá ra là do lỗi đặt nhiệt độ kéo dài chưa đủ thời gian. Em tăng lên 2 phút là OK.
Công việc tiếp theo sẽ là TA cloning bằng plasmid pGEMT, rồi cắt ghép tùm lum... Có gì trục trặc...
Vâng, cảm ơn bác rất nhiều! Em làm cùng 1 anh tutor người Spain là tay có nhiều kinh nghiệm, anh ấy cũng đồng ý với em về cặp mồi này. Nên trước mắt chưa thay đổi primer.
Sau khi post câu hỏi xong em cũng chợt ngớ người vì do em tính sai, khi setup nhiệt độ elongation là 30" vì tính nhầm đoạn...
Trục trặc với PCR
Em chào các bác,
Em đang thử chạy PCR với cặp mồi mới em tự thiết kế. Các thông số như sau:
- Máy PCR: Agilent Technology
- Enzyme: BioTaq polymerase
- Dung dích phản ứng: 50 microlit
- Target fragment: 3kb
- DNA template ngon lành, vì check không thấy smear, băng đậm.
- Chu...
Em hiện đang tiến hành nghiên cứu về lúa tại Nhật, GS hướng dẫn của em rất muốn em đăng 1 bài ở Hội Di truyền học VN.
Do đó, em muốn hỏi các bác về các nội dung sau:
1. Em có thể gửi bài báo của em đến Hội DTH VN hay tạp chí Di truyền học và ứng dụng khi nào?
2. Các yêu cầu đối với 1 bài...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.