Nucleic acid capture assay

Trần Phương

Senior Member
chao cac anh chi
em dang lam bai bao cao ve chu de nay nhung khong hieu:
Fetal hemoglobin gene expression analysis in human bone marrow cells. To demonstrate the ability of the NACA technology to measure the expression of a specific gene directly in crude cell lysate, the expression of the human fetal hemoglobin gene was analyzed in primary bone marrow cells treated with hemin (Fig. 5). To validate the approach, the NACA data were compared with quantitative RT±PCR data generated after RNA purification and subsequent specific amplification (see Materials and Methods). As shown in Figure 5A, the
quantitative RT±PCR revealed a 10-fold increase in gHb gene expression in response to in vitro treatment of the bone marrow cells with hemin as compared with the untreated
control cells. Similar results were obtained with the NACA using the indirect (Fig. 5B) or direct modified capture (Fig. 5C) as described in Figures 1B and 4E, respectively. In addition to validating the NACA technology with `real world samples', the agreement between the NACA and quantitative RT±PCR results demonstrates the experimental advantage of the NACA over conventional PCR-based approaches for this type of
application. Notably, the human fetal hemoglobin gene expression was analyzed using the NACA directly from cell lysates without requiring a time-consuming RNA purification
step or an expensive real-time PCR instrument.
bai goc nam o trang: http://nar.oxfordjournals.org/cgi/reprint/31/6/e25

Tai sao ho su dung hemin lam gi, va tai sao su dung Ribosome Protein L19 lam chung noi.

Mong cac anh chi nao biet giup do dum em.
 
chao cac anh chi
em dang lam bai bao cao ve chu de nay nhung khong hieu:
...
Tai sao ho su dung hemin lam gi, va tai sao su dung Ribosome Protein L19 lam chung noi.

Mong cac anh chi nao biet giup do dum em.

Theo ý hiểu của mình thì hemin là chất dùng để làm tăng biểu hiện gen mà họ quan tâm. Mục đích là tạo mô hình để đánh giá khả năng phát hiện sự thay đổi của thử nghiệm NACA.
Ribosome Protein L19 được sử dụng là chứng nội có nghĩa là:
Người ta xác định mức độ biểu hiện của gen quan tâm và của ribosome Protein L19. Sau đó, tính ra tỉ lệ mức biểu hiện của gen quan tâm so với ribosome Protein L19. Tỉ lệ này được dùng để so sánh sự thay đổi mức biểu hiện của gen quan tâm ở các mẫu khác nhau. Chứng nội kiểu này sẽ giúp chúng ta so sánh được mức biểu hiện của gen quan tâm mà không cần để ý đến lượng mẫu để tách chiết RNA dùng cho phân tích nhiều hay ít. Sở dĩ ribosome Protein L19 để chọn làm chứng nội là do mức biểu hiện của nó tương đối ổn định, ít nhất là trong trường hợp này mức biểu hiện của nó được cho là không bị ảnh hưởng bởi hemin.
 

Facebook

Thống kê diễn đàn

Threads
12,995
Messages
72,869
Members
45,065
Latest member
Go88aa
Back
Top