What's new

Dien di protein

saomai491

New member
Anh chị có thể giải thích tại sao khi chạy điện di SDS-page, các band không rõ? Làm sao xác định molecule weight protein và sau đó phải làm như thế nào?
Cám ơn anh chị nhiều!
 

matnapitxi

New member
1. Em đang điện di protein sds-page, lúc đầu có xuất hiện các vạch, sau đó khi chạy lại thì không thấy có vạch nào. Anh chị cho em hỏi tại sao lại như vậy? Em hỏi thầy em thì thầy nói là có thể không đủ hàm lượng protein. Nhưng sau khi cô đặc mẫu vẫn không thấy có vạch.
2. Em chạy điện di sds-page theo phương pháp của Laemmli (1970), lúc đầu pha stacking gel 3% thì khoảng 15 phút là đông rồi. Còn bây giờ em cũng làm y như công thức mà để 1 tiếng cũng không đông. Anh chị có thể giải thích cho em không?
Đây là công thức pha stacking gel 3% của em:
2.5 ml 4X Stacking Gel Buffer
6.5 ml dH2O
1.0 ml Acrylamide (29:1)
200 microlit 10% APS
20 microlit TEMED
* 4X Stacking Gel Buffer
0.5 M Tris pH 6.8 6.06 g Tris Base
pH to 6.8 with HCl
0.4% SDS 0.4 g SDS
up to 100 ml with dH2O
 

saomai491

New member
Giống như thầy bạn nói hàm lượng protein không đủ, bạn thử extract mẫu lại thử xem.
Còn gel không đặc có thể do APS bạn đã pha lâu nên mất hoạt tính, bạn nên pha vừa đủ dùng khi chuẩn bị gel thôi.
bạn thử xem sau. Chúc bạn thành công!
 

Facebook

Top