Search results

  1. V

    Học bổng Sau đại học Ngành Hóa Sinh tại các trường hàng đầu châu Á

    Học bổng này từ 2012, giờ còn nữa không chủ top?
  2. V

    Cloning với bất kỳ insert và vector

    Giá cái này lab mình mua tính ra khoảng 300 usd cho 10 rxns, 1 100 usd cho 50 rxns. Nhưng thực tế ở lab mình chỉ làm phản ứng với ½ volume thôi nên với 300 usd mình có thể làm được 20 rxns.
  3. V

    DNA shuffling???

    Ban tham khao cai nay xem co giup duoc gi khong: Clone multiple DNA fragments simultaneously into any vector http://www.clontech.com/products/detail.asp?product_id=206261&tabno=2
  4. V

    Cloning với bất kỳ insert và vector

    Sau mấy tháng dùng kit này thấy tín nhiệm thật. Không phải làm subcloning, không cần bận tâm đến restriction site. Dùng kít này mình còn có thể cắt, nối các đoạn gen tùy ý với nhau, mutation thoải mái, đơn giản. (hình như mình đang PR cho công ty này rùi).
  5. V

    Chao ban, neu nhu minh muon thu pfu cua ban thi lam the nao?

    Chao ban, neu nhu minh muon thu pfu cua ban thi lam the nao?
  6. V

    Phần mềm DNASTAR SV_ngheo

    Mình cũng đang dùng DNASTAR. Gói này GS mình mua có bản quyền, hôm trước một thằng ở lab đưa cho mình cài vào máy xách tay. Nó làm ra vẻ quan trọng lắm bảo cái này đắt tiền, chỉ dùng ở đây thôi không được đem về VN (tự ái quá !). Nếu có phần mềm khác thay thế được thì cho mình xin bản nhé để...
  7. V

    Cloning với bất kỳ insert và vector

    Mình đọc thấy cái này rất hay. Nhưng không biết có ai đã dùng kit này chưa, kết quả thực sự như thế nào cho bà con biết với: In-Fusion™ Advantage PCR Cloning Kits http://www.clontech.com/products/detail.asp?product_id=206261&tabno=6
  8. V

    “Tôi chưa thấy lý do nào để ngừng việc táy máy của mình”

    Nếu có 'reference' thì hay hơn chứ nhỉ.
  9. V

    Ligation: đang gặp vấn đề

    Việc mình đang làm có 1 công đoạn liên quan đến cloning nên mình mới học làm cloning mấy tháng nay. Nghe bà con thảo luận cũng mở mang thêm được nhiều. Mình cứ đinh ninh kit TOPO, với vector pCR 2.1 như bạn arinaga nói là dùng cho AT cloning thôi chứ nhỉ. Chà chà, nhiều cái phải học quá
  10. V

    Ligation: đang gặp vấn đề

    Mình cũng gặp trường hợp không insert được vào TOPO2.1 với các insert dài hơn 1,5kb. Sau đó mình dùng TOPO-XL, quá trình chuẩn bị insert yêu cầu rất khắt khe: tránh UV, đảm bảo có A overhang… thì insert thành công. Nhưng vì loại này (vẫn là của Promega) so với TOPO2.1 thì đắt hơn nhiều lần nên...
  11. V

    Hỏi về kinh nghiệm dùng Phusion polymerase cho PCR

    Vẫn chưa được bà con ạ. Ở các tube có Ta dưới 56 độ thì không thấy gì còn các tube Ta cao hơn thì có 1 band không đặc hiệu khoảng hơn 1kb nhưng cũng rất mờ. Không biết phải làm gì bây giờ bà con?
  12. V

    Hỏi về kinh nghiệm dùng Phusion polymerase cho PCR

    - Mình cũng chỉ mới tập làm về cloning, chưa bao giờ chạy nested cả. Vì genome của vi rút này là 8 RNA riêng lẻ, mình nhân lên toàn bộ chiều dài của cac RNA từ nu đầu tiên đến nu cuối cùng luôn. - Mình chạy Ta từ 61-69 do: Thứ nhất, theo khuyến cáo: General instructions GUIDE • Use 98°C for...
  13. V

    Hỏi về kinh nghiệm dùng Phusion polymerase cho PCR

    Các gen mình làm dài 2,2kb và 2,3kb, tỷ lệ GC khoảng 43-44% (đã có sẵn sequence: GenBank EU662956 và EU662960). Đây là gen của vi rút RNA(-) nên mình tạo template là cDNA từ một RT, và lượng template này dùng cho mỗi reaction 50ul trong pcr là 2-4ul. Mình làm với pfu và taq thì có band nhưng vẫn...
  14. V

    Hỏi về kinh nghiệm dùng Phusion polymerase cho PCR

    Mình vẫn chạy PCR với Taq và pfu để nhân các đoạn gen của vi rút cúm và làm vi rút tái tổ hợp. Do vậy tỷ lệ đọc sai sẽ ảnh hưởng rất lớn đến sự thành công khi tái tổ hợp. Mình đọc mấy bài báo thấy họ khuyên dùng Phusion polymerase để có độ chính xác cao nhất. Do vậy mình đặt mua enzyme này về...
  15. V

    Thể tích phản ứng PCR mà bạn đã chạy là bao nhiêu?

    Nói các bạn đừng cười. Mình chưa bao giờ thử chạy ở thể tích nhỏ như vậy, khi chạy gradient mình cũng chỉ dám chạy ở thể tích 20ul. Lab mình cũng có cái máy mới, mình thấy có hay cái giá nhựa như hai hàng của các tube nối với nhau mà mình không biết có phải là giá nhựa mà bạn Viet23ht nói đến không?
  16. V

    Cần trợ giúp gấp-PCR với template là plasmid

    Amplify được plasmid rồi, vấn đề là giảm nhiệt độ gắn mồi xuống tới 45oC, hời gian gắn mồi cũng phải dài đến 1 phút và giảm lượng plasmid làm template (khoảng 0,5ng cho 1 reaction 50ul). Giờ plasmid và gene của mình đều có overlap ở 2 đầu (vì F/R primer của plasmid và R/F primer của gen bổ sung...
  17. V

    Cần trợ giúp gấp-PCR với template là plasmid

    Mình đang làm thí nghiệm với một plasmid Phw2000 để nhân và tái tổ hợp gene của vi rút cúm. Mình muốn dùng plasmid đã có insert rồi làm khuôn và chạy PCR lấy toàn bộ Plasmid ở dạng mạch thẳng, trong đó mỗi đầu chứa khoảng 12-13 nucleic của viruts cúm. Mình đã có sequence và thiết kế cặp mồi có...
  18. V

    PCR problems

    Làm thế nào để amplify toàn bộ sequence của plasmid Mình đang làm thí nghiệm với một plasmid Phw2000 để nhân và tái tổ hợp gene của vi rút cúm. Mình muốn dùng plasmid đã có insert rồi làm khuôn và chạy PCR lấy toàn bộ Plasmid ở dạng mạch thẳng, trong đó mỗi đầu chứa khoảng 12-13 nucleic của...
Top