Nhờ anh chị lấy dùm em bài báo này:
1. Competitive allele specific TaqMan PCR for KRAS, BRAF and EGFR mutation detection in clinical formalin fixed paraffin embedded samples
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0014480012000226
2. Direct detection of Rare Circulating Tumor Cells in...
Hi bạn,
Mình nghĩ mình không hiểu nhầm gì cả. Ở đây ý mình bảo là bạn ý dùng cột để loại bỏ DNA >50 bp (bằng cột), DNA này thì là DNA từ phản ứng cắt bằng RE của bạn chủ thớt chứ mình không bảo là từ gel điện di. Cái cột đó nó giữ được DNA > 50 bp nên cái dịch ly tâm bạn thu được sẽ là DNA <...
Mình thắc mắc chút về chạy PCR với các đoạn >50 bp, bạn có thể giải thích chút được không?
Mình chợt nảy ra ý là sao bạn không dùng cột để giữ tất cả các đoạn >50 bp (bỏ đi) và thu dịch ly tâm chứa các đoạn <50 bp. Sau đó tủa cồn để thu tủa cho nồng độ cao khi hòa trong TE lượng ít, nhưng thật...
Bạn thử cắt băng, hòa băng đó bằng đệm của các kit cột bạn đang dùng đó, sau đó tủa bằng phương pháp như Bạn Hồ Hữu Thọ nói xem sao "Thử với tách chiết bằng phenol/chloroform và tủa bằng cồn xem có được không?" mình thấy các kít hiện nay dùng cột thì họ bảo thu được kích thước từ 50 bp nên mình...
Dùng UNG để tránh nhiễm với nguy cơ cao nhất là sản phẩm PCR trước đó. Còn bạn vẫn phải chạy đối chứng âm để kiểm soát nhiễm nữa cơ mà (cho nguồn nhiễm khác). Còn về nested PCR thì mình nghĩ là bạn hiểu vì sao mà phải chạy nested rồi, và nếu làm thì mình nên chạy PCR1 = phản ứng không sử dụng...
Có thế tóm tắt các bước như sau:
Master mix (UNG, dUTP, polymerase, dNTP...) + template để PCR. Sản phẩm PCR sẽ bao gồm có các điểm có UTP.
Các phản ứng PCR khác cũng như vậy, nếu các sản phẩm PCR này nhiễm vào phản ứng PCR tiếp theo của bạn (đây là nguồn dễ gây nhiễm nhất). Và khi nhiễm các...
Nhờ các bạn lấy hộ bài báo này với
Universal diagnostic RT-PCR protocol for arboviruses
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0166093498000032
Cảm ơn nhiều
Mình biểu hiện gen bằng tế bào động vật bạn ạ, sử dụng vector virus, đó là hướng nghiên cứu thôi, chứ bây giờ mình đang bắt đầu từ việc tạo dòng cDNA của gen đích thôi, nhưng chưa có kinh nghiệm vì tìm tài liệu họ toàn dùng thư viện cDNA. Mình cũng đã đọc sách về thiết kế mồi rồi, họ cũng nói về...
Chào bạn, mình có 1 thắc mắc về thiết kế mồi RT-PCR khi mà mình biểu hiện gen mà mình quan tâm. Vì ở đây mình không có thư viện cDNA, nên mình phải làm trực tiếp bằng RT-PCR. Vậy mồi thiết kế cần lưu ý gì? về trình tự, vị trí so với gen (vì mình muốn biểu hiện mà), vì mình nghĩ là nó phải liên...
Nhờ mọi người lấy hộ bài này. Cảm ơn nhiều.
Drugs and their molecular targets: an updated overview
Fundamental & Clinical PharmacologyVolume 22, Issue 1, pages 1–18, February 2008...
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.