Mình có thử làm đột biến điểm dựa theo QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit (Stratagene) và thấy một số chú ý bổ sung thêm:
- Sử dụng proofreading DNA polymerases (như Pfu...) để tránh tạo đầu thừa và hạn chế đột biến ngoài ý muốn
- Số chu kỳ PCR nên giảm thiểu
- Plasmid khuôn nên có kích...
Một khía cạnh khác của RNA interference:
Vasudevan S, Tong Y, Steitz JA. Switching from repression to activation: microRNAs can up-regulate translation. Science. 2007 Dec 21;318(5858):1877-8.
1. Chuyển vector có f1 ori vào E. coli (có F' epi)
2. Gây nhiễm E. coli bằng phage phù hợp
3. Nuôi E. coli để tổng hợp ssDNA => tách
4. Tạo đột biến, thường sử dụng primer
Vector của bác sử dụng cho tế bào động vật, theo em hiểu T7 pro được dùng để biểu hiện gen sơ bộ, kiểm tra trước trong E. coli chẳng hạn. Giống như phage, với F1 ori ta có thể tạo ra DNA mạch đơn, thường sử dụng trong việc tạo đột biến.
Giá thế còn đắt đấy :D, những ai gửi mẫu lẻ kiểu sinh viên làm thực tập tốt nghiệp, bên mình không tính tiền :p. Bên mình không làm dịch vụ, giúp đỡ và giao lưu là chính thôi nên giá đưa ra chẳng có ý nghĩ gì.
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.