Go Back   Diễn đàn Sinh học Việt Nam > Giảng đường > Thực vật

Thực vật Dành cho các bộ môn Sinh lý thực vật, Hình thái giải phẫu thực vật và Hệ thống học thực vật

 
Trả lời
 
Ðiều Chỉnh Xếp Bài
Old 15-03-14, 21:39   #1
giongcaynongnghiep
Registered Users
 
giongcaynongnghiep's Avatar
 
Tham gia ngày: Mar 2014
Bài gửi: 1
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Hiện tại bên mình đang có cung cấp giống chuối nuôi cấy mô. Nhưng mình thực sự cũng chưa hiểu lắm vê phương pháp nuôi cấy mô này. Mong mọi người giải thích giúp. các bạn có thể liên hệ qua mail hoặc sđt 0979589557 thân ái
giongcaynongnghiep is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn

Sponsored Links
Old 17-03-14, 19:48   #2
nguyenquocdong89
Thành viên
 
nguyenquocdong89's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2009
Bài gửi: 108
Thanks: 43
Thanked 27 Times in 12 Posts
Trích:
Nguyên văn bởi giongcaynongnghiep View Post
Hiện tại bên mình đang có cung cấp giống chuối nuôi cấy mô. Nhưng mình thực sự cũng chưa hiểu lắm vê phương pháp nuôi cấy mô này. Mong mọi người giải thích giúp. các bạn có thể liên hệ qua mail hoặc sđt 0979589557 thân ái
Chào bạn. Mình cũng đang làm về Nuôi cấy mô, nói ra thì nó nhiều bước và nhiều cách lắm. Mình khuên nếu bạn muốn tìm hiểu có thể lên google search lấy một quyển về Công nghệ sinh học, hay nuôi cấy mô tế bào thực vật sẽ rất rõ ràng. Cong nếu hỏi chi tiết và đi sâu thì mình có thể trả lời cho bạn. Nơi mình đang làm việc, mình cũng đang nhân chuối Tiêu hồng , chuối tây mô, hoa lan các loại, Cây dược liệu Ba Kích, Đinh lăng, các cây lâm nghiệp, hoa dạ yến thảo nữa. Không biết Gía Chuối mô bên bạn thế nào? Có gì LH mình qua email. nguyenquocdong89@gmail.com
Thân ái
nguyenquocdong89 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 04-09-14, 15:47   #3
minhducmc19
Registered Users
 
minhducmc19's Avatar
 
Tham gia ngày: Jul 2014
Bài gửi: 3
Thanks: 1
Thanked 0 Times in 0 Posts
  • Các giai đoạn trong nhân giống cấy mô:
Giai đoạn 0: Chuẩn bị cây mẹ
Giai đoạn 1: Bắt đầu tiệt trùng mẫu cấy
Giai đoạn 2: Nhân chuyền
Giai đoạn 3: - Kéo dài
- Tạo rễ và tiền thuần dưỡng
Giai đoạn 4: Thuần dưỡng
1. Cây mẹ và mẫu cấy:
a. Cây mẹ: Cây lấy mẫu muốn đạt được kết quả tốt cần lưu ý các điều kiện sau:
- Chế độ dinh dưỡng của cây mẹ: cây phải sinh trưởng và phát triển tốt.
- Cây mẹ phải bảo đảm sạch bệnh.
- Vị trí lấy mẫu trên cây: Mẫu được lấy ở phần trên mặt đất thì dễ đạt hơn.
- Thời gian lấy mẫu.
b. Mẫu cấy: Tỷ lệ thành công của công đoạn vô trùng mẫu cấy phụ thuộc các yếu tố sau:
- Tình trạng sinh lý của mẫu cấy ban đầu rất quan trọng, những mô trưởng thành tốt
hơn mô già cõi, nếu mẫu cấy là chồi thì phải đủ độ thành thục (chồi bánh tẻ).
- Mô bên trong ít nhiễm hơn bên ngoài. Ví dụ như mầm bên trong, bầu, hạt... Mô bên
trên mặt đất ít nhiễm hơn mô dưới mặt đất.
- Những mẫu kích thước nhỏ thì ít nhiễm hơn mẫu lớn, nhưng khả năng sống sót kém
hơn.
2. Sự vô trùng:
Trong nuôi cấy mô, tiệt trùng mẫu cấy là rất quan trọng nhằm đảm bảo mẫu cấy không bị
nhiễm khuẩn, thông thường sử dụng các phương pháp nhiệt, lọc, hoá chất ...

Hoá chất
Nồng độ áp dụng
Thời gian áp dụng (phút)
Calci hypochlorite
9-10%
5-30
Nước Javel hoặc Clorox (NaOCl)
2% của dung dịch tẩy rửa (20% NaOCl)
5-30
Nước Brom
1-2%
2-10
H2O2
10-20%
5-15
AgNO3
1%
5-30
HgCl2
0.1-1%
2-10
Kháng sinh
400-500 mg/l
30-60




3. Một số vấn đề phát sinh trong khử trùng bề mặt mẫu cấy:
- Virus: là tác nhân gây hại nguy hiễm trong nông nghiệp. Một mẫu cấy nhiễm virus có
thể tạo ra vô số cây con nhiễm. Vì vậy để tạo cây giống không nhiễm virus thì mẫu cấy ban
đầu phải đảm bảo không bị nhiễm virus. Để đảm bảo loại bỏ virus có thể dùng phương
pháp nuôi cấy đỉnh sinh trưởng kết hợp với nhiệt trị, hoá trị hoặc vi ghép.
- Vi khuẩn: nhiễm do vi khuẩn thường gặp trong nuôi cấy mô. Vi khhuẩn có thể sống tự
do trong không khí. Sự hiện diện của chúng trong môi trường nuôi cấy gây nhiều bất lợi,
có thể gây chết cây hoặc làm chậm sinh trưởng của mẫu nuôi cấy.
Trong thực tế, việc quản lý mẫu cấy và môi trường nuôi cấy vô trùng là rất khó khăn. Đôi
khi triệu chứng nhiễm xuất hiện chậm trong môi trường nuôi cấy hoặc sau vài lần cấy
chuyền. Các vi khuẩn gây nhiễm thường gặp trong quá trình nuôi cấy là Agrobacterium,
Bacillus, Pseudomonas, Lactobacillus, Staphylococus. Biện pháp khắc phục phổ biến là
cấy đỉnh sinh trưởng hoặc dùng kháng sinh.
- Nấm: rất dễ nhiễm trong quá trình nuôi cấy làm hạn chế sự phát triển của mẫu cấy, làm
chết mẫu cấy. Nhiều loại nấm thường gặp trong nuôi cấy mô là Aspergillus, Candida, Microsprium, Phialopora. Sự nhiễm nấm thường dễ phát hiện sau 1 đến 2 tuần cấy mẫu, nguyên nhân
gây nhiễm là do khử trùng bề mặt mẫu cấy chưa sạch hoặc hoá chất khử trùng chưa thích
hợp, nhiễm do thao tác cấy chuyền hoặc bởi côn trùng nhỏ...
4. Hiện tượng thừa nước
Hiện tượng thừa nước được biểu hiện như lóng ngắn hơn cây bình thường, mộng nước,
giòn, dễ gẫy, màu sắc bất thường, chủ yếu do:
- Mẫu cấy: tuỳ loài giống, độ dài thời gian cấy chuyền, số lần cấy chuyền, cách đặt mẫu
cấy trên môi trường.
- Môi ttrường: loại và nồng độ agar, nồng độ của khoáng, loại và nồng độ auxin.
- Bình chứa quyết định thành phần và nồng độ khí.
5. Sự hoá nâu
Mẫu cấy và môi trường thường trở nên nâu hoặc đen sau khi cấy, sau một thời gian mô
thường chết. Sự sinh trưởng bị ảnh hưởng nặng ở những loài có nồng độ tanin cao hoặc
các hợp chất phenol.
* Cách khắc phục sự hoá nâu:
- Để các mẫu đã cấy vào trong tối hoặc nơi ánh sáng ít hơn.
- Cấy chuyền nhiều lần, có thêm chất oxy hoá vào môi trường nuôi cấy.
- Ngâm trong nước máy hoặc trong các chất oxy hoá như Acid ascorbic (Vitamin C); acid
citric...Sau khi khử trùng mẫu cấy có thể ngâm trong nước cất đã khử trùng 1-2 giờ tuỳ đặc
tính của mô cấy.
6. Sự thuần dưỡng:
Cây được nuôi trong phòng đến khi hoàn chỉnh thì cho ra ngoài thuần dưỡng thành cây
con thành thục ở ngoài môi trường tự nhiên thích hợp.

Điều kiện trong keo
Điều kiện bên ngoài nhà lưới
Nhiệt độ: 26 ± 20C
Ẩm độ: Tương đương 100%
Cường độ ánh sáng: 1000 lux
Nhiệt độ: 29 - 340C
Ẩm độ: Tương đương 67-75%
Cường độ ánh sáng: 3000-4000
lux






Cấu trúc hình thái và giải phẩu của cây cấy mô có một số khác biệt so với cây con trồng trong
nhà lưới:
- Lớp cutin: do ẩm độ trong bình nuôi cấy cao nên sự thiếu lớp sáp dày trên bề mặt lá
là một trong những nguyên nhân làm cho cây cấy mô dễ mất nước và dễ chết trong điều kiện
tự nhiên.
- Khí khẩu: ở cây cấy mô thì khí khẩu có dạng tròn so với bình thường cây trồng trong nhà
lưới có cấu trúc hình elip. Mặt khác, cây cấy mô có số khí khẩu trên đơn vị diện tích lá nhiều
hơn cây trồng trong nhà lưới. Khí khẩu của cây cấy mô chưa có chức năng đóng mở, khi
chuyển từ bình nuôi cấy ra môi trường bên ngoài hầu hết khí khẩu đều mở. Vì vậy, trong
những ngày đầu khi chuyển cây cấy mô ra môi trường ngoài sự mất nước của cây rất cao.
- Lá của cây cấy mô mỏng hơn lá của cây trồng trong nhà lưới.
- Thân của cây cấy mô thiếu mô giữa và cương mô là những mô hỗ trợ cho sự cứng
chắc của thân. Vì vậy, cây cấy mô thường yếu hơn cây trồng trong nhà lưới.
- Rễ của cây cấy mô thường chưa có chức năng như một số loài, rễ chưa phát triển
lông hút, chưa hoàn chỉnh sự liên kết giữa hệ mạch rễ và thân.


7. Một số ứng dụng nổi bật:
Ứng dụng nuôi cấy mô trong giai đoạn hiện nay để nhân nhanh cây giống là rất cần thiết,
nhất là đối với những giống cây khó nhân nhanh bằng biện pháp thông thường hoặc cần sản
xuất ra hàng loạt theo nhu cầu thị trường.
Tuy nhiên nếu sản xuất ra số lượng nhiều mà không có người mua thì không có hiệu quả.
Do đó thường thì cơ sở nuôi cấy mô sản xuất theo đơn đặt hàng trước.
minhducmc19 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 20-10-15, 20:41   #4
Minh Phúc Khổng
Thành viên
 
Minh Phúc Khổng's Avatar
 
Tham gia ngày: Oct 2015
Bài gửi: 11
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
bạn cho mình xin tỷ lệ pha môi trường mẹ và lấy ra bao nhiều của mỗi MS khi vào môi trường nuôi cấy được không ạ, mình cảm ơn
Minh Phúc Khổng is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 26-10-15, 11:05   #5
nguyenhuuthien_42
Registered Users
 
nguyenhuuthien_42's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2013
Bài gửi: 1
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Thank bài viết nhé.
nguyenhuuthien_42 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Trả lời

Ðiều Chỉnh
Xếp Bài

Chuyển đến


vB 3.8.7 Copyright © 2000 - 2017, Jelsoft Enterprises Ltd.