Sự ra đời của PCR real-time và RT-PCR real-time đã làm thay đổi sâu sắc lĩnh vực định lượng biểu hiện gen. PCR real-time là kỹ thuật thu dữ liệu trong suốt quá trình phản ứng PCR, do đó kết hợp quá trình khuếch đại và phát hiện vào một bước duy nhất. Người ta đạt được điều này bằng cách sử dụng...
Introduction
The advent of real-time PCR and real-time reverse transcription PCR (real-time RT-PCR) has dramatically changed the field of measuring gene expression. Real-time PCR is the technique of collecting data throughout the PCR process as it occurs, thus combining amplification and...
Tóm tắt
PCR real-time đã trở thành một trong những phương pháp định lượng gen được sử dụng nhiều nhất vì phương pháp này có dải đo rộng, độ nhạy rất tốt, đặc hiệu cao, ít hoặc không cần thao táo sau khi khuếch đại, và có thể đáp ứng được với số mẫu ngày càng lớn. Tuy nhiên, để thực sự phát...
Bạn có thể xem xét giải pháp sau: Thiết kế mồi forward ngắn lại và thêm một đoạn 5'-tail vào cho nó đủ dài như mồi bình thường. Ngoài ra bạn nên tiến hành tổng hợp cDNA bằng gene-specific primer để tăng độ đặc hiệu của phản ứng. Chúc bạn thành công!
Mình thấy là open access hay không thì nhà xuất bản vẫn được thu tiền, chỉ khác là thu của ai và bao nhiêu thôi. Không open access thì họ thu tiền của người đọc, còn open access thì họ thu tiền của tác giả bài báo. Có ai biết theo cách nào thì nhà xuất bản sẽ thu được nhiều tiền hơn không ạ?
Mình dùng phần mềm thương mại OLIGO để thiết kế mồi thì yêu cầu như của bạnt thực hiện khá đơn giản, nhưng mình đoán bạn không có những phần mềm như vậy. Mình không biết các phần mềm free như primer 3 thì có chức năng bạn cần không, bạn thử tìm hiểu xem sao. Bạn cũng có thể sử dụng lệnh Search...
Có bài tổng quan hay về Real-time PCR để định lượng mRNA, có bạn nào muốn dịch bài này ra tiếng Việt không nhỉ?
REAL-TIME PCR FOR mRNA QUANTITATION
Real-time PCR has become one of the most widely used methods of gene quantitation because it has a large dynamic range, boasts tremendous...
Absolute thì cần dựng standard curve, mình thắc mắc là cái mẫu mình cần đo mình có phải biết (đo) hàm lượng luôn không?
Ý của bạn hàm lượng ở đây là gì, mình không hiểu.
Hay không cần biết và sẽ được suy ra từ standard curve?
Standard curve sẽ được dựng từ số liệu của...
Những câu dài bạn nắm cấu trúc tổng thể của câu trước rồi dịch, chẳng hạn câu thứ 2 có cấu trúc như sau:
When PCD (S1) features (V1) marginalization of the chromatin in the nucleus, breakage of the cytoplasm and nucleus into small, sealed packets, and processing and fragmentation of the DNA at...
Chúc mừng thành công mới của anh Bình và nhóm nghiên cứu! Chúc cho những nỗ lực, tâm huyết của anh và nhóm sẽ tiếp tục đạt được nhiều kết quả quan trọng trong tương lai.
[URL="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23142383#"]
Nckicken có thể xem xét khả năng chạy PCR với gradient nhiệt độ kéo dài chuỗi từ 45-68°C. Hoạt tính của enzyme sẽ thấp hơn ở 72°C nên có thể phải điều chỉnh thời gian kéo dài chuỗi.
@Nchicken:
- Bạn thử search theo keyword "slippage" và "DNA replication" để tìm hiểu xem.
- Bạn thử với enzyme Kapa HiFi DNA polymerase xem có cải thiện được tình hình không. Bạn cũng có thể xem xét khả năng tiến hành PCR với nhiệt độ kéo dài chuỗi thấp hơn bình thường.
This site uses cookies to help personalise content, tailor your experience and to keep you logged in if you register.
By continuing to use this site, you are consenting to our use of cookies.